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人外周血淋巴細胞分離液

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  • 北京諾博萊德科技有限公司
  • 2024-08-25 18:43:22
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【簡單介紹】

用途:用于體外分離外周淋巴血細胞,也可以從其他來源中分離單核細胞,包括臍帶血細胞和骨髓細胞。LSM® 是一種滅菌過濾溶液,每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克鈉胺。密度是1.0770-1.0800克/毫升20℃。

【詳細說明】

人外周血淋巴細胞分離液用途:用于體外分離外周淋巴血細胞,也可以從其他來源中分離單核細胞,包括臍帶血細胞和骨髓細胞。LSM® 是一種滅菌過濾溶液,每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克鈉胺。密度是1.0770-1.0800克/毫升20℃。      

使用說明:

1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合 

 

2. 無菌轉移3 mlLSM到15 ml離心管中。 

 

3. 混合2 ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2 ml 生理鹽水 

 

4. 仔細的將稀釋血液加入3 mlLSM(室溫)于15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。 

 

5. 室溫下400g離心15-30分鐘,離心可以沉淀紅細胞和多核白細胞同時可以再LSM上形成一層單核淋巴細胞,如上圖所示。 

 

6. 吸出淋巴細胞上方2-3mm的血漿。 

 

7. 吸取淋巴細胞層以及它下面一半的LSM和轉移到另外的一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細胞離心管中,室溫離心10分鐘,離心速度設定在既不損傷細胞又能沉淀細胞即刻,例如160 - 260 x g(去除LSM和降低血小板的百分比)。  

8. 用平衡鹽緩沖液清洗細胞,用適當的培養基重懸細胞。                 

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