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北京諾博萊德科技有限公司

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聯系人:江經理
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供求商機

SDS裂解液

  • 發布日期:
  • 有效日期:
  • 所 在 地:
  • 產  地:
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  • 2025年3月12日
  • 2025年9月12日
  • 北京北京市
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【產品簡介】

本公司供應化學試劑的SDS裂解液,*,歡迎洽談。


【詳細說明】

 

SDS裂解液
本公司供應化學試劑的SDS裂解液,*,歡迎洽談。
們生產的SDS裂解液(SDS Lysis Buffer)是一種比較強烈的細胞組織裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的WesternChIP(染色質免疫共沉淀,chromatin immunoprecipitation)等。
關于我們生產的不同的裂解液的主要特點和差異,以及如何選擇裂解液可參考附錄。
SDS
裂解液的主要成分為50mM Tris(pH8.1)1% SDS,以及2mM sodium pyrophosphate25mM β-glycerophosphate1mM EDTA1mM Na3VO40.5 ug/ml leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。
SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品,可以用我們生產的BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑,不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
使用說明:
對于培養細胞樣品:
1.
融解SDS裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM
2.
對于貼壁細胞:去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗。按照6孔板每孔加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后,細胞就會被裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上繼續裂解10分鐘。
對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上繼續裂解10分鐘。
3.
充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGEWesternChIP等操作。
裂解液用量說明:通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。如果用于ChIP,建議6孔板每孔細胞至少加入200微升裂解液。
對于組織樣品:
1.
把組織剪切成細小的碎片。
2.
融解SDS裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM
3.
按照每20毫克組織加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上繼續裂解10分鐘。
5.
充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGEWesternChIP等操作。
6.
如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

用于普通的WesternIPco-IP,我們推薦使用WesternIP細胞裂解液(P1001),該裂解液已被國內各大研究機構廣泛使用,用戶普遍反映很好。裂解細胞或組織后,沒有非常粘滯的透明狀DNA團塊形成,不必采用超聲處理等就可以非常理想地用于后續操作。另外該裂解液裂解的產物也適合用于磷酸化蛋白的Western檢測。
對于某些特殊蛋白的IP,如果發現WesternIP細胞裂解液(P1001)效果不是非常理想,可以嘗試用RIPA裂解液強、中或弱NP-40裂解液。如果發現IP的時候背景很高,即非特異的蛋白也被IP下來,則需要選用裂解強度較高的裂解液,例如RIPA裂解液強或中。如果發現目的蛋白無法被IP下來,則說明裂解液的強度過強,可以使用較為溫和的裂解液例如RIPA裂解液NP-40裂解液。
對于某些難溶解蛋白的Western,如果發現WesternIP細胞裂解液(P1001)效果不是非常理想,可以嘗試使用裂解強度更高的裂解液例如RIPA裂解液強、中SDS裂解液。
 
保存條件:
-20℃保存,一年有效。
注意事項:
為取得*的使用效果,盡量避免過多的反復凍融。可以適當分裝后使用。
裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
關于裂解液的選擇,一方面可以參考我們生產的各種裂解液主要特點、差異,選擇合適的裂解液;另一方面也需要通過一些預實驗來摸索*的適合您實驗條件的裂解液。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

貨號
產品名稱
品牌
規格
價格(元)
P0910
NP-40裂解液
NobleRyder
100ml
220.00
P0160
PMSF(100mM)
NobleRyder
1/10ml
30.00/100.00
P0902
RIPA裂解液(強)
NobleRyder
100ml
220.00
P0908
RIPA裂解液(強中弱套裝)
NobleRyder
3*50ml
280.00
P0906
RIPA裂解液(弱)
NobleRyder
100ml
220.00
P0904
RIPA裂解液(中)
NobleRyder
100ml
220.00
P0912
SDS裂解液
NobleRyder
100ml
220.00
P0907
Western及IP細胞裂解液
NobleRyder
100ml
220.00
P0916
非變性細胞裂解緩沖液
NobleRyder
100ml
220.00

    
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