三聚氰胺檢測卡基于競爭抑制免疫層析技術，通過抗原抗體特異性結合實現快速篩查。其核心原理可分為以下步驟：
1.膠體金標記抗體：信號載體與識別元件
檢測卡中預先將抗三聚氰胺單克隆抗體與膠體金顆粒（直徑20-40nm）結合，形成金標抗體復合物。膠體金顆粒通過靜電作用穩定分散，其表面標記的抗體可特異性識別三聚氰胺分子。例如，深圳后王電子科技有限公司的檢測卡采用高親和力單克隆抗體，確保對三聚氰胺的檢測靈敏度達0.5mg/kg（液態奶）。
2.硝酸纖維素膜固定抗原：檢測線與質控線
在硝酸纖維素膜上，通過噴涂技術固定兩條關鍵線：
檢測線（T線）：包被三聚氰胺-載體蛋白偶聯物（如三聚氰胺與牛血清白蛋白結合），作為競爭結合位點。
質控線（C線）：包被抗鼠IgG抗體，用于驗證檢測流程有效性。
3.競爭反應：樣本中的三聚氰胺與固定抗原“爭奪”抗體
當樣本（如液態奶、奶粉稀釋液）滴入加樣孔后，通過毛細作用沿膜層析：
陰性樣本：不含三聚氰胺時，金標抗體未被結合，繼續遷移至T線，與固定偶聯物結合形成紅色條帶；同時，部分金標抗體與C線抗鼠IgG結合，顯示第二條紅色條帶。此時T線和C線均顯色，判定為陰性。
陽性樣本：含三聚氰胺時，樣本中的三聚氰胺與金標抗體結合，封閉其抗原結合位點，阻止其與T線偶聯物結合，導致T線不顯色；而C線仍顯色，驗證檢測有效。此時僅C線顯色，判定為陽性。
4.結果判定與靈敏度控制
靈敏度：通過調整金標抗體濃度、T線偶聯物密度及層析速度，實現檢測限優化。例如，智云達檢測卡對液態奶的檢測限為0.5mg/kg，嬰兒奶粉為1mg/kg。
無效判定：若C線未顯色，無論T線如何，均視為檢測卡失效，需重新檢測。
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