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目錄:山東藍都生物科技有限公司>>食品安全檢測>>試劑盒>> 快速RNA免提取SYBR Green熒光PCR檢測試劑盒

快速RNA免提取SYBR Green熒光PCR檢測試劑盒
  • 快速RNA免提取SYBR Green熒光PCR檢測試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
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具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 其他品牌
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 濱州市
屬性

供貨周期:一周 應用領域:生物產業

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更新時間:2023-04-27 11:03:52瀏覽次數:1140評價

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供貨周期 一周 應用領域 生物產業
本試劑盒中采用du特配方,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,無需重復離心便可獲得高質量的病毒RNA,適用于以RNA為模板的定量PCR的檢測。本產品可用于細胞培養液、血液、血清中病毒RNA的提取。

快速病毒RNA免核酸提取

SYBR Green熒光PCR檢測試劑

 

試劑盒簡介:本試劑盒中采用du特配方,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,無需重復離心便可獲得高質量的病毒RNA,適用于以RNA為模板的定量PCR的檢測。本產品可用于細胞培養液、血液、血清中病毒RNA的提取。

 

試劑盒組成

組分

M-DNA01

RNA-Lysis

         1.5 mL      50T

2×one step SYBR Green Mix

200 μL       ( 50T )

SYBR Green Enzyme

50 μL         ( 50T )

樣品稀釋液

20  ml         ( 50T )

保存-20oC 保存,保存期一年。

注意:使用前將RNA-Lysis室溫充分混勻。

準備的儀器:離心機、移液器、PCR儀

使用方法

一、 樣品的處理方法

1.少量樣本處理方法

1吸取15μL樣本放入1.5ml離心管中。

2)加入25 μL RNA Lysis。

3)充分混勻,室溫靜置5分鐘,加入350µL樣品稀釋液混勻。

410,000rpm離心1分鐘,1-2μL作為PCR反應模板。

2.大量樣本處理方法

1分別吸取15μL不同的樣本依次放入8聯管中。

2)加入25 μL RNA Lysis。

3)充分混勻,室溫靜置5分鐘,10,000rpm離心1分鐘。

4分別從(3)中吸取10μL處理后樣品依次加入一新的8聯管。

5每孔分別加入90µL樣品稀釋液混勻。取1-2μL作為熒光PCR反應模板。

二、在RNase free 的離心管中配制PCR反應體系(以ROCH 480 為測試機型)

PCR反應體系

20 μL體系(推薦)

2×one step SYBR Green Mix

10 μL

SYBR Green Enzyme

1μL

Forward Primer (10 μM)

0.4-1μL

Reverse Primer (10 μM)

0.4-1 μL

Template RNA

1-2 μL

ddH2O

補足至20 μL

 

三、反應程序


溫度

時間

循環數

逆轉錄

50oC

15min

1

預變性

95oC

30sec

1

循環反應

95oC

10sec

 

40-45

60oC

30sec

 

溶解曲線

95oC

5sec

1

55oC

1min

1

97oC

-

1

     對于有復雜結構的模板,可以將逆轉錄溫度提高到55oC,有助于提高擴增效率;

延伸時間請根據使用儀器所需要的數據采集最短時間進行調整;

溶解曲線的設定,根據儀器的默認采集程序設定即可。

 

注意事項

1)在進行大量樣品檢測時,可將本試劑盒的試劑預分裝到8 PCR管,用多通道移液器進行多樣本的處理。

2)取樣的細胞量應當適中,濃度不宜過高或過低,處理后溶液應當以透明為宜。擴增病毒基因時需要根據病毒的滴度決定取樣的細胞數量。

3)樣品處理過程中應當防止交叉污染,推薦設置陰性樣品參與處理過程,以檢測環境的污染。

4)PCR的退火溫度可根據引物的預測Tm值減去5℃,或者通過梯度PCR摸索最佳退火溫度。

5)用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存 1個月。

6)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。


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