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您知道顯色反應避光對ELISA實驗的重要性嗎?
閱讀：2367 發布時間：2018-10-17 秋之悠，是秋高氣爽、落葉飛舞;秋之雅，是清風明月，海闊天空;秋之彩，是層林盡染、遍地金黃;秋之韻，是秋月融融，秋水盈盈。金秋十月，滬鼎生物祝您生活愉快!接下來，我公司為您揭曉顯色反應避光對ELISA試劑盒實驗的重要性，好消息千萬不要錯過哦。
這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性，顯色清晰者為陽性。但在ELSIA試劑盒中，正常人血清反應后常可出現呈色的本底，此本底的深淺因ELISA試劑盒的組成和實驗的條件不同而異，因此實驗中必須加測陰性對照。
陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時，更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。此時酶催化無色的底物有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中，加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。
ELISA試劑盒定性測定的顯色可在室溫進行，時間一般不需要嚴格控制，有時可根據陽性對照孔和陰性對照孔的顯se情況適當縮短或延長反應時間，及時判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30分鐘后即不再加深，再延長反應時間，可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色，顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD產物用硫酸終止后，顯色由橙黃色轉向棕黃色。
TMB受光照的影響不大，可在室溫中置于操作臺上，邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩定性，宜在規定的適當時間閱讀結果。TMB經HRP作用后ELISA試劑盒，約40分鐘顯色達，隨即逐漸減弱，ELISA試劑盒至2小時后即可*消退至無色。
TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色，此時可用特定的波長測讀吸光值。
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