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ELISA實驗操作對試劑盒本身的影響
閱讀：1818 發(fā)布時間：2019-2-22ELISA試劑盒在科研領域運用尤為廣泛，它以其特異性強和靈敏度高的特點被大家所親睞，今天與大家說說ELISA試劑盒測定的過程。
ELISA試劑盒測定過程：
固相包被→加待測樣品→溫育→洗刷+加酶標物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加停止液→比色→斷定成果。
ELISA試劑盒操作較冗雜,在操作中應留意以下4個方面：
1.在成批手藝檢測中，還應留意操作時差的影響。加樣及混勻時刻的差異，使抗原抗體反響和酶促反響時刻不一致，對競爭法及定量檢測影響很大，不留意可能會導致過錯成果或定量禁絕。
2.洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議試驗成敗的一個關鍵過程。意圖是除掉未結合的免疫反響物，停止抗原抗體反響，除掉標本中與反響無關的成分、游離的酶標物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質。可用洗板機洗板或手藝洗板，前者洗刷質量較好，各反響孔洗刷作用均一，批內、批間差異小，手藝洗板應留意操控各孔洗刷作用，差異不宜太大。
3.跟著病況的發(fā)展或由其他要素影響，某些抗體在機體內的含量發(fā)作大幅動搖，因此有必要對標本進行預處理。直接法測定中，標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。
4.加樣一般運用加液器，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標本、加酶結合物、加底物和加停止液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴，避免穿插污染。加酶結合物、底物和停止液時則不需更換吸嘴。
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