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技術(shù)文章

細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

閱讀:2881          發(fā)布時(shí)間:2016-8-25

細(xì)胞色素P450酶是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱。其分成五十多個(gè)亞酶:CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation)。

 

您需要準(zhǔn)備:

1.5毫升離心管:用于標(biāo)準(zhǔn)樣品配制和反應(yīng)的容器

培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)

200微升1厘米光徑比色皿或黑色96孔板:用于熒光分析的容器

 

熒光分光光度儀過(guò)熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析

  • 準(zhǔn)備好待測(cè)樣品(例如細(xì)胞裂解萃取液或微粒體樣品等),置于冰槽里
  • 設(shè)定好熒光分光光度儀(溫度為37℃):激發(fā)波長(zhǎng)370nm,散發(fā)波長(zhǎng)450nm,并置零 
  • 準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管,標(biāo)記為1至5號(hào)管
  • 分別加入25微升緩沖液(Reagent A)到每個(gè)離心管
  • 移取25微升標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent E)到1號(hào)管,混勻
  • 小心移取25微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent E)到2號(hào)管,混勻
  • 小心移取25微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent E)到3號(hào)管,混勻
  • 小心移取25微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent E)到4號(hào)管,混勻
  • 將1至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用,避免光照;標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表

?   計(jì)算方式:

    【根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基香豆素濃度(微摩爾/升)×0.2(體系容量;毫升)×樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.02(樣品容量;毫升×15(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)】=納摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=納摩爾/毫克/分鐘

 

  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感

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