化工儀器網技術文章
酵母氫ATP酶活性酶連續反應光譜法定量檢測試劑盒 產品說明書
閱讀：1538 發布時間：2016-7-13主要用途
我公司酵母氫ATP酶（H＋-ATPase）活性酶連續反應光譜法定量檢測試劑是一種旨在使用氫ATP酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續循環法反應系統，在排除其它ATP酶干擾的情況下，受到氫ATP酶的水解產生的ADP過程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反應， 即采用光譜法測定其氧化后吸光峰值（NADH濃度）的變化，以此進行測算單位酶活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種酵母細胞H＋-ATP酶的特異性活性檢測。產品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定，反應優化，檢測敏感。
注意事項
1． 本產品為21次操作，包括背景對照測定
2． 操作時，須戴手套
3． 系統操作過程中，背景測定只需1次
4． 建議樣品忌用磷酸緩沖溶液、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、EDTA、EGTA等，可以使用SUCROSE、IMIDAZOLE等
5． 用戶如果檢測質膜型氫ATP酶活性，建議使用真菌/酵母細胞膜蛋白（本公司提供可溶性真菌/酵母細胞膜蛋白粗提制備試劑盒30043.1）
6． 用戶如果檢測液泡型氫ATP酶活性，建議使用真菌/酵母細胞液泡蛋白（本公司提供真菌/酵母膜性囊泡（RSOV和IOV）制備試劑盒10169.3）
7． 強化液（Reagent B）為固體狀，移取方法為：使用1毫升槍頭，將部分剪去；或使用0.5毫升PCR管的蓋子內圈盛滿；或秤重0.1克
8． 加入樣品啟動反應后3秒內即刻光譜測定
9． 反應測定值由高到低變化；測定可以持續30分鐘
10． 測定值由高到低變化，即0分鐘測定讀數高于10分鐘或30分鐘測定讀數，表明有酶活性
11． 光譜測定后，比色皿須清洗*
12． 建議待測樣本蛋白濃度為50微克/50微升；如果樣本酶活性過低或過高，則可以增加或降低樣本量；注意計算公式的調整（本公司提供 Bradford蛋白質濃度定量試劑盒30030.1）
13． 樣品特異活性是指排除其它，包括鈣（EGTA處理）、鈉鉀（烏本苷；ouabain處理）等ATP酶的干擾后的氫ATP酶活性
14． 氫ATP酶活性單位濃度定義：在28℃溫度下，pH 7.5條件下，每分鐘內能夠氧化1微摩爾還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）所需的酶量作為一個活性單位
15． 本公司提供系列ATP酶類分析技術產品
如：
細菌氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒
植物氫ATP酶（H＋－ATPase）總活性比色法定量檢測試劑盒
植物P型氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒
植物V型氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒
植物F型氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒