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翌圣生物科技（上海）股份有限

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供應簡介

THP-1/NF-KB/Lu cell line是用人急性單核細胞性白血病細胞THP-1（懸浮細胞）通過慢病毒轉染方法，將REPOTMNF-kB報告基因轉入THP-1細胞構建而成的穩定轉染細胞株。

詳細介紹

REPO^TMNF-kB報告基因的結構是以4個重復的NF-kB轉錄因子結合位點和TA box作為啟動子，啟動Luciferase的表達，并通過嘌呤霉素進行篩選。THP-1/NF-KB/Lu cell line主要用于檢測細胞中NF-kB信號轉導通路的活性和藥物篩選等。THP-1/NF-KB/Lu cell line的應用大大節省了研究人員的寶貴時間和精力，為研究人員提供了更簡便，快速和有效的研究方法。

產品清單：

產品名稱	產品規格	產品包裝	保存條件	產品編號
THP-1/NF-KB/Lu cell line	6×10⁶	1管	液氮	GM-023001
說明書	-	-	-	-

保存條件：

液氮保存，干冰運輸。

穩轉細胞株的穩定性：

基因組的不穩定性是所有穩轉細胞株共同存在，且不可避免的一個生物現象。因此，我們建議客戶在拿到細胞后的開始階段就進行大量細胞凍存是很關鍵的。

培養條件：

1. 培養基：RPMI1640（2 mM L-glutamine,1.5g/L sodium bicarbonate,4.5 g/L glucose,10 mM HEPES and 1.0 mM sodium pyruvate ）+10%胎牛血清+100ug/ml雙抗；選擇培養：+0.5～1μg/ml嘌呤霉素

2. 培養條件：37℃，5%CO2

3. 凍存條件：常規培養基+20%胎牛血清+10%DMSO

細胞培養：

1. 細胞復蘇

（1）. 細胞實驗室進行常規消毒，紫外照射40min以上。
（2）. 恒溫水浴箱37℃預熱20min，備用。
（3）. 從液氮保存罐中取出凍存管，立即放入37℃水浴箱中，快速搖晃，直至凍存液*融化。

注：水浴箱中的水不能接觸瓶蓋。
（4）. 將細胞懸液移入15ml離心管，緩慢加入4ml培養液，離心（1000r/min，5min）。
（5）. 用培養基懸液混懸沉淀細胞，調整細胞濃度，放培養箱中培養。

2. 細胞培養

（1）. 細胞每隔3～4天傳代一次，每次傳代密度為7×10⁵個/ml。
（2）. 為了保證細胞的良好生長狀態，細胞培養時密度不能大于2×10⁶個/ml。

3. 細胞凍存

凍存時的細胞密度應達到5～7×10⁶個/ml，這才能保證更好的復蘇效率。

THP-1/NF-KB/Lu cell Luciferase的檢測：

1．將適量濃度的THP-1/NF-KB/Lu cell細胞接種于96孔板/24孔板/6孔板等，37℃，5%CO₂，過夜培養；

2．研究者根據實驗要求，向THP-1/NF-KB/Lu cell 中加入所需生物制劑（siRNA、shRNA、化合物、慢病毒表達載體、蛋白等）；

3．繼續培養18~36h后，按照熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒得要求，進行Luciferase表達量的檢測。

注意事項：

細胞為凍存狀態運輸，收到細胞后建議馬上復蘇、培養。如果暫時不使用請繼續保持液氮儲存。

產品價格：

貨號	名稱	產地	規格	報價/元
GM-023001	THP-1/NF-kB/Lu cell line細胞	Genomeditech	1管	20000

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