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X-gal
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更新時間:2025/3/12 21:00:48

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供應簡介
分子式為C14分子式為H15BrClNO6,分子量為408.63,CAS Number 7240-90-6。
X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會產生藍色產物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色檢測以及藍白斑篩選。


詳細介紹

 

產品名稱:X-gal (abbreviated to BCIG) is a galactoside and indole.也稱5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside,中文名為5--4--3-吲哚-β-D-半乳糖苷。
產品信息:分子式為C14分子式為H15BrClNO6,分子量為408.63,CAS Number 7240-90-6
X-Galβ-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會產生藍色產物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色檢測以及藍白斑篩選。
備注:X-gal買來的時候是固體
你可以按照《分子克隆》的附錄配制成液體
有一個配制方法可以參考:
溶液配制方法】5--4--3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解配制成的20mg/ml的貯存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中,裝有溶液的試管須用鋁箔封裹以防因受光照而被破壞,并應貯存于-20℃。溶液無須過濾除菌。也就是每1ML中稱取20MG就行.
藍白斑篩選:藍白斑篩選是重組子篩選的一種方法,是根據載體的遺傳特征篩選重組子,如α-互補、抗生素基因等?,F在使用的許多載體都帶有一個大腸桿菌的DNA的短區段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調控序列和前146個氨基酸的編碼信息。在這個編碼區中插入了一個多克隆位點(MCS),它并不破壞讀框,但可使少數幾個氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影響功能,這種載體適用于可編碼β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主細胞。因此,宿主和質粒編碼的片段雖都沒有酶活性,但它們同時存在時,可形成具有酶學活性的蛋白質。這樣,lacZ基因在缺少近操縱基因區段的宿主細胞與帶有完整近操縱基因區段的質粒之間實現了互補,稱為α-互補。由α-互補而產生的LacZ+細菌在誘導劑IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在時產生藍色菌落,因而易于識別。然而,當外源DNA插入到質粒的多克隆位點后,幾乎不可避免地導致無α-互補能力的氨基端片段,使得帶有重組質粒的細菌形成白色菌落。這種重組子的篩選,又稱為藍白斑篩選。如用藍白斑篩選則經連接產物轉化的鈣化菌平板37℃溫箱倒置培養12-16hr后,有重組質粒的細菌形成白色菌落。 
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