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小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A ELISA試劑盒

48T--------1000

96T--------1800

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A ELISA試劑盒

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往

預(yù)先包被血管生成素2(ANG-2)抗體的包被微孔中，依次加入標本、

標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯

色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成

終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管生成素2(ANG-2)呈正相關(guān)。

用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細

胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心

地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘

取上清。

保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存

于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項

1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的

濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解

后再使用。

2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保

存。

3. 濃度為 0 的 S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明

書操作時樣本已經(jīng)稀釋 5 倍，終結(jié)果乘以 5 才是樣本實際濃度。

4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

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上海復(fù)申生物科技有限公司

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