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紫外/可見分光光度計的測定方法
(一)定量分析
一、法
基于朗伯-比爾定律A= εbC，當(dāng)某-物質(zhì)在一 一定波長下e (吸收系數(shù)，可由已知濃度樣品通過測量、計算求得)為-常數(shù)，比色皿的光程也是已知，也是一個常數(shù)，只要在吸收系數(shù)的波長處測定樣品溶液的吸光度值(D值)，然后由下式求得該樣品溶液的濃度或含量:
C=A/εb
二、標(biāo)準(zhǔn)對照法
在同樣條件下，在選定的波長處，分別測定已知濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值A(chǔ)標(biāo)和樣品溶液的吸光度值A(chǔ)樣，然后由下式求得樣品溶液的濃度或含量:
C樣= A樣+ AgxC標(biāo)
三、標(biāo)準(zhǔn)曲線法(包括K因數(shù)法)
三、標(biāo)準(zhǔn)曲線法(包括K因數(shù)法)
常用的定量分析方法。即在一定波長(λ ma)下測定某max物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光度作校正曲線，然后測定樣品溶液的吸光度值，由校正曲線求得樣品溶液的濃度或含量。
所配置的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光度應(yīng)在0.1~1.bs范圍內(nèi)，吸收測定的精密度可達(dá)0.5%。
注意: UV/Vis的低檢測濃度與吸收系數(shù)、儀器噪聲、基線平直度、光譜帶寬有關(guān)。而檢測濃度則與吸收系數(shù)、儀器的雜散光、光譜帶寬等有關(guān)，吸收系數(shù)與光譜帶寬有關(guān)。
雜散光越小，檢測上限越高。