RL1大鼠肺細胞系
RL1大鼠肺細胞系作為源自大鼠肺組織的上皮細胞模型,因保留肺上皮細胞te有的呼吸功能相關特性、屏障保護作用及損傷應答機制,在肺部生理功能調控、呼吸系統疾病機制及藥物肺毒性評估中具有重要價值,成為探究肺部相關疾病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠肺實質的支氣管及肺泡上皮組織,經原代培養和純化獲得。細胞形態呈典型的上皮樣,多為立方形或多邊形,胞體大小均勻(直徑約 16-22μm),胞質豐富且呈嗜酸性,可見大量線粒體和內質網,約 12% 的細胞存在細小胞質突起,細胞核呈圓形或橢圓形,位于細胞中央,核仁清晰。生長方式為貼壁生長,呈單層鋪路石樣排列,接觸抑制明顯,傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數符合正常肺上皮細胞特征:倍增時間約 58 小時,連續傳代 20 次后仍保持穩定的生物學特性;表面標志物表達獨te,甲狀腺轉錄因子 - 1(TTF-1)陽性率達 95%,細胞角蛋白 18(CK18)陽性率 93%,緊密連接蛋白 occludin 陽性率 90%;具有正常的二倍體核型(染色體數 42 條),無染色體畸變;呼吸功能相關特性顯著,可表達肺泡表面活性物質相關蛋白 A(SP-A),基礎分泌量達 28ng/mL,對氧氣的轉運效率達適宜生理范圍;分泌功能活躍,炎癥因子 IL-6 基礎分泌量為 15pg/mL,受刺激后可顯著升高;無微生物污染,細胞純度達 97%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在呼吸功能相關機制研究中,RL1 細胞經低氧(5% 氧氣)處理 48 小時后,缺氧誘導因子 - 1α(HIF-1α)表達量增加 4.3 倍,血管內皮生長因子(VEGF)分泌量提升 60%,可模擬缺氧狀態下肺上皮細胞對呼吸功能的調節過程,為解析肺部氧氣代謝的分子機制提供理想模型。
肺部炎癥研究方面,該細胞經脂多糖(LPS)處理后,炎癥因子 TNF-α 分泌量增加 5.2 倍,白細胞介素 - 8(IL-8)表達量提升 65%,細胞凋亡率達 38%;而經抗炎藥物處理后,炎癥反應強度下降 58%,細胞存活率提升 52%,可模擬細菌性肺炎中的肺上皮損傷過程,適用于探究肺部炎癥的發病機制及治療策略。
肺損傷修復研究領域,該細胞經二氧化氮(肺損傷誘導劑)處理后,氧化應激水平提升 70%,修復相關基因 HSP70 表達量增加 4.8 倍,細胞遷移速率提升 55%,能很好地模擬化學性肺損傷及修復過程,為探究肺損傷后的再生機制提供實驗基礎。此外,該細胞與肺巨噬細胞共培養時,巨噬細胞的吞噬活性提升 45%,炎癥因子分泌量增加 3.2 倍,可用于探究肺上皮細胞與免疫細胞相互作用在肺部疾病中的調控機制。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基,添加 2mM 谷an酰胺、0.1ng/mL 表皮生長因子(EGF)及 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2-3 天更換一次,以維持細胞的正常功能和活性。傳代時,用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入專用上皮細胞解離液,37℃孵育 8-10 分鐘,待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例為 1:2-1:3,每 5-6 天傳代一次,避免過度傳代導致功能下降。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,細胞濃度調整為 3×10?個 /ml,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇存活率達 86% 以上,3-4 代內可恢復正常的生長和功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物且排列規則后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁更換培養條件,以防影響其呼吸功能相關特性及損傷應答能力。
RL1 大鼠肺細胞系以其穩定的肺上皮特性、完整的呼吸功能相關特征及典型的損傷應答能力,在肺部生理研究、呼吸系統疾病機制探索及藥物研發中發揮著重要作用,為揭示肺部疾病的發病機制和開發肺保護藥物提供了可靠的細胞模型。
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