NRK-52E正常大鼠腎細胞系
NRK-52E正常大鼠腎細胞系作為源自大鼠腎臟近曲小管的上皮細胞模型，因保留完整的腎小管重吸收功能及代謝活性，在腎臟生理功能、藥物腎毒性及腎小管損傷機制研究中應用廣泛，成為探究腎小管上皮細胞生物學特性的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠正常腎臟皮質近曲小管組織，經原代培養和永生化處理建立。細胞形態呈典型上皮樣，多為立方形或多邊形，排列緊密呈鋪路石樣，胞質豐富，可見刷狀緣結構，約 8% 細胞呈現雙核現象，細胞核呈圓形，核仁清晰。生長方式為貼壁生長，具有明顯接觸抑制，傳代后 24 小時貼壁率達 95%。核心參數表現出腎小管上皮特征：倍增時間約 60 小時，連續傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型（染色體數 42 條）；近曲小管標志物 γ- 谷氨酰轉移酶（GGT）、堿性磷酸酶（ALP）活性分別為正常腎小管細胞的 82% 和 78%；細胞角蛋白 18（CK18）免疫熒光陽性率達 97%，水通道蛋白 1（AQP1）表達豐富；葡萄糖重吸收能力顯著，經 10mM 葡萄糖處理后，細胞內葡萄糖累積量是腎成纖維細胞的 5.3 倍；無微生物污染，細胞純度達 98%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在腎小管損傷機制研究中，NRK-52E 細胞經shun鉑類似物處理 24 小時后，乳酸脫氫酶（LDH）釋放量增加 3.8 倍，凋亡率升高 42%，緊密連接蛋白 occludin 表達量下降 56%，可模擬藥物誘導的腎小管上皮細胞損傷過程，為解析腎毒性分子機制提供理想模型。藥物篩選領域，該細胞對腎保護藥物反應敏感，經抗氧化劑處理后，高糖誘導的活性氧（ROS）水平下降 62%，細胞存活率提升 45%，適用于評估藥物的腎小管保護作用。在腎臟代謝研究方面，該細胞表達完整的藥物代謝酶系統，細胞色素 P450 1A1（CYP1A1）活性達原代細胞的 75%，可用于研究藥物在腎臟的代謝轉化過程。此外，將該細胞接種于人工基底膜上，可構建腎小管上皮極性模型，用于研究物質跨上皮轉運機制。
培養與保存規范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基，添加 1% 非必需氨基酸、1% 抗生素混合液，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。培養基需每 3 天更換一次，更換時動作輕柔以避免細胞脫落。傳代時采用含 EDTA 的消化液處理，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞間隙增大后加入含血清的培養基終止消化，傳代比例為 1:2-1:3，每 5-6 天傳代一次，維持細胞融合度在 70%-80% 以保持正常功能。凍存液配方為基礎培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇細胞存活率達 92% 以上，3-4 代內可恢復正常的物質轉運功能。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養 24 小時，更換培養基后觀察細胞形態，確認無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用，禁止用于臨床診療相關研究。
NRK-52E 正常大鼠腎細胞系以其穩定的腎小管功能、完整的代謝活性及易于培養的優勢，在腎臟相關研究與藥物開發中發揮著重要作用，為揭示腎小管生理病理機制提供了可靠的細胞模型。
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