來(lái)源與形態(tài)：BHK-21 細(xì)胞于 1961 年首ci從 1 日齡敘利亞倉(cāng)鼠的腎臟組織中分離獲得，經(jīng)傳代篩選后形成穩(wěn)定細(xì)胞系。體外培養(yǎng)時(shí)呈成纖維樣形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形或星形，排列疏松，具有良好的延展性。在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)環(huán)境中，增殖速度快，傳代周期約 1-2 天，可長(zhǎng)期傳代且保持穩(wěn)定活性，同時(shí)支持貼壁培養(yǎng)向懸浮培養(yǎng)的馴化，適應(yīng)規(guī)模化生產(chǎn)需求。

遺傳特征：該細(xì)胞系為永生細(xì)胞系，核型呈非整倍體，染色體數(shù)目約 44-46 條，核型穩(wěn)定且無(wú)內(nèi)源性病毒污染。其基因組背景清晰，對(duì)外源基因的容納能力較強(qiáng)，轉(zhuǎn)染后可高效表達(dá)目標(biāo)產(chǎn)物。此外，細(xì)胞對(duì)多種營(yíng)養(yǎng)成分的需求簡(jiǎn)單，無(wú)需復(fù)雜的生長(zhǎng)因子補(bǔ)充，這一特性使其在基礎(chǔ)研究與工業(yè)生產(chǎn)中均易于操作。

優(yōu)勢(shì)：培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單，對(duì)培養(yǎng)基成分要求低，可適應(yīng)含血清或無(wú)血清培養(yǎng)體系；病毒敏感性高，能支持多種病毒的完整復(fù)制周期，且病毒增殖效率遠(yuǎn)超其他細(xì)胞系；增殖速度快，可通過(guò)懸浮培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)，滿足工業(yè)化需求；細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性強(qiáng)，長(zhǎng)期傳代后仍保持一致的生物學(xué)特性，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，被世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦為疫苗生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系之一。

局限性：作為動(dòng)物細(xì)胞系，其對(duì)部分人類病毒（如肝炎病毒）的敏感性較低，應(yīng)用范圍存在一定限制；長(zhǎng)期傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)變異或病毒敏感性下降，需通過(guò)定期凍存原始細(xì)胞株來(lái)維持穩(wěn)定性；懸浮培養(yǎng)時(shí)易出現(xiàn)細(xì)胞聚集體，可能影響病毒或蛋白的均一性生產(chǎn)。

培養(yǎng)條件：常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 MEM 或 DMEM 培養(yǎng)基，添加青mei素 - 鏈mei素混合液抑制細(xì)菌污染。若用于大規(guī)模病毒培養(yǎng)，可采用旋轉(zhuǎn)瓶或生物反應(yīng)器進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，配合無(wú)血清培養(yǎng)基減少外源蛋白干擾，便于后續(xù)純化。培養(yǎng)過(guò)程中需控制細(xì)胞密度（貼壁培養(yǎng)融合度不超過(guò) 80%），避免過(guò)度密集導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變或增殖停滯。

污染防控：貼壁細(xì)胞易受支原體、真菌污染，需定期通過(guò) PCR 或熒光染色法檢測(cè)；凍存時(shí)需加入 10% 二甲基亞砜（DMSO）作為保護(hù)劑，在液氮中可長(zhǎng)期保存，復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴快速解凍，離心去除 DMSO 以減少細(xì)胞損傷。