目錄:上海乾思生物科技有限公司>>細(xì)胞>>細(xì)胞系>> BY-1292CHO中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系
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更新時(shí)間:2025-07-28 13:18:28瀏覽次數(shù):240評(píng)價(jià)
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來源與形態(tài):CHO 細(xì)胞最初分離自成年中國(guó)倉(cāng)鼠的卵巢上皮組織,體外培養(yǎng)時(shí)呈上皮樣形態(tài),貼壁生長(zhǎng),細(xì)胞呈多邊形或短梭形,排列緊密,邊緣清晰。在 37℃、5% CO?的培養(yǎng)環(huán)境中,增殖穩(wěn)定,傳代周期約 2-3 天,可適應(yīng)貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)基體系,經(jīng)馴化后能在生物反應(yīng)器中實(shí)現(xiàn)高密度培養(yǎng)(細(xì)胞密度可達(dá) 1×10?個(gè) /mL 以上)。
遺傳特征:該細(xì)胞系為永生細(xì)胞系,核型呈非整倍體,染色體數(shù)目約 20-22 條,核型穩(wěn)定且無內(nèi)源性病毒序列。其基因組背景清晰,對(duì)外源基因的容納能力強(qiáng),轉(zhuǎn)染后可通過抗性篩選獲得穩(wěn)定表達(dá)株。與原代細(xì)胞相比,CHO 細(xì)胞無接觸抑制特性,可無限傳代且保持生物學(xué)特性穩(wěn)定,這一優(yōu)勢(shì)使其能滿足長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)與規(guī)模化生產(chǎn)需求。
重組蛋白藥物生產(chǎn)
基因工程與功能研究
藥物篩選與毒性評(píng)估
優(yōu)勢(shì):遺傳穩(wěn)定性強(qiáng),長(zhǎng)期傳代后仍保持外源蛋白的穩(wěn)定表達(dá);翻譯后修飾能力優(yōu)異,產(chǎn)物生物活性接近天然蛋白;培養(yǎng)適應(yīng)性強(qiáng),可在貼壁與懸浮體系中高效增殖,便于工業(yè)化生產(chǎn);且無內(nèi)源性病毒污染,生物安全性高,被 FDA、EMA 等國(guó)際監(jiān)管機(jī)構(gòu)認(rèn)可為合規(guī)生產(chǎn)細(xì)胞系。
局限性:部分復(fù)雜蛋白(如多亞基膜蛋白)的表達(dá)量較低,需通過培養(yǎng)基優(yōu)化或基因改造提升產(chǎn)量;懸浮培養(yǎng)時(shí)易形成細(xì)胞聚集體,增加下游純化難度;與人類細(xì)胞的糖基化模式仍存在細(xì)微差異,可能影響部分藥物的體內(nèi)療效。
培養(yǎng)條件:常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,添加青mei素 - 鏈mei素抑制污染。生產(chǎn)階段多采用化學(xué)成分明確的無血清培養(yǎng)基,減少批次差異與外源因子干擾。培養(yǎng)過程中需控制溶氧、pH 值等參數(shù)(pH 維持在 7.2-7.4),避免細(xì)胞密度過高(懸浮培養(yǎng)密度不超過 1×10?個(gè) /mL)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)耗竭。
污染防控:貼壁細(xì)胞易受支原體污染,需定期通過 PCR 檢測(cè);凍存時(shí)使用含 10% DMSO 的凍存液,液氮保存可長(zhǎng)期維持活性,復(fù)蘇時(shí) 37℃快速解凍并離心去除 DMSO,降低細(xì)胞損傷。
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