RIN-M5F大鼠胰島β細胞瘤細胞系
RIN-M5F大鼠胰島β細胞瘤細胞系在糖尿病研究領域ji具價值,憑借其模擬胰島 β 細胞功能的特性,成為探究胰島素分泌調控、胰島 β 細胞損傷機制及糖尿病藥物篩選的關鍵實驗模型,為糖代謝相關研究提供了可靠的細胞平臺。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠胰島 β 細胞瘤組織,經克隆化培養建立。細胞形態呈上皮樣,多為多邊形或短梭形,胞質豐富,可見分泌顆粒,細胞核呈圓形或橢圓形,位于細胞中央,核仁清晰。生長方式為貼壁生長,排列呈鋪路石狀,傳代后 24 小時貼壁率達 92%。核心參數表現穩定:倍增時間約 48 小時,連續傳代 50 次后仍保持異常染色體核型(染色體數約 45-47 條);胰島 β 細胞特異性標志物胰島素、C 肽及葡萄糖轉運蛋白 2(GLUT2)表達陽性,經免疫熒光檢測呈強陽性,細胞純度達 94%;無細菌、真菌、支原體及病毒污染,確保實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在胰島素分泌調控研究中,RIN-M5F 細胞對葡萄糖濃度變化敏感,當培養基中葡萄糖濃度從 5.6mmol/L 升至 16.7mmol/L 時,2 小時胰島素分泌量增加 2.3 倍,可模擬生理狀態下胰島 β 細胞的葡萄糖應答反應,為解析胰島素分泌的分子機制提供理想模型。糖尿病機制研究方面,該細胞在高糖(33mmol/L)長期刺激下,會出現胰島素分泌功能減退(48 小時分泌量下降 42%),同時活性氧(ROS)水平升高 2.1 倍,能模擬糖尿病狀態下胰島 β 細胞的 “糖毒性" 損傷,助力糖尿病發病機制的解析。藥物篩選領域,該細胞對磺脲類降糖藥反應顯著,經處理后,胰島素釋放量提升 1.8 倍,適用于評估新型促胰島素分泌藥物的效能及作用靶點。此外,將細胞與胰島 α 細胞共培養,可構建體外胰島微環境模型,用于研究胰島內細胞間的旁分泌調控機制。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基,添加 1% 抗生素混合液預防污染,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。培養基需每 2 天更換一次,更換時應注意維持葡萄糖濃度穩定(常規培養用 11.1mmol/L 葡萄糖)。傳代時采用含 EDTA 的消化液處理,待細胞間連接松散后加入含血清的培養基終止消化,傳代比例為 1:3-1:5,每 4-5 天傳代一次,維持細胞融合度在 70%-80% 以保持分泌功能。凍存液配方為基礎培養基 + 10% DMSO+20% FBS,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇細胞存活率達 88% 以上,3-4 代內可恢復正常的胰島素分泌功能。運輸采用干冰凍存管或 T-25 培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 12 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用,禁止用于臨床診療相關研究。
RIN-M5F 大鼠胰島 β 細胞瘤細胞系以其穩定的胰島素分泌功能、明確的糖應答特性及易于培養的優勢,在糖尿病基礎研究與藥物研發中發揮著不可替代的作用,為揭示胰島 β 細胞生物學規律和開發糖尿病新療法提供了有力支撐。
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