H4-II-E-C3大鼠肝細胞瘤細胞系
H4-II-E-C3大鼠肝細胞瘤細胞系作為 H-4-II-E 細胞系的克隆亞系，因具有更顯著的惡性表型和特異性分子特征，在肝癌亞型異質性研究中占據重要地位，成為解析肝細胞癌亞型分化差異及精準治liao機制的關鍵實驗模型。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自 H-4-II-E 細胞的單克隆篩選株，經體外長期傳代純化獲得。細胞形態以上皮樣為主，呈現更明顯的梭形化趨勢，胞質內脂滴空泡數量減少至母系細胞的 60%，細胞核畸形程度加劇，多核細胞比例升至 45%，核仁數量增加至 2-3 個。生長方式為貼壁生長，細胞排列更疏松，接觸抑制現象wan全消失，傳代后 24 小時貼壁率達 92%，略高于母系細胞。核心參數表現出亞型特異性：倍增時間縮短至 36 小時，較母系細胞提升 25%；連續傳代 50 次后染色體核型更不穩定（染色體數約 42-48 條）；肝癌標志物甲胎蛋白（AFP）表達量較母系細胞升高 40%，免疫熒光陽性率達 96%，但熱休克蛋白 70（HSP70）表達量下降 18%；白蛋白分泌量降至正常肝細胞的 22%，顯著低于母系細胞；無微生物污染，細胞純度達 97%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在肝癌亞型差異研究中，H4-II-E-C3 細胞與母系細胞的轉錄組對比顯示，1287 個基因存在顯著表達差異，其中上皮 - 間質轉化（EMT）相關基因 Twist1 表達量升高 3.1 倍，E - 鈣粘蛋白表達量下降 58%，可模擬肝癌不同亞型的分子特征差異，為解析肝癌異質性機制提供理想模型。藥物敏感性研究方面，該細胞對靶向藥物反應呈現du特模式，經 MEK 抑制劑處理后增殖活性下降 72%，較母系細胞敏感程度提升 35%，而對 PI3K 抑制劑敏感性降低 28%，能很好地反映肝癌亞型的藥物反應差異，助力個體化治療策略的探究。在轉移機制研究領域，該細胞 Transwell 穿膜能力是母系細胞的 1.6 倍，基質金屬蛋白酶 - 2（MMP-2）分泌量增加 65%，經 Twist1 沉默后轉移能力降低 53%，適用于研究高轉移潛能亞型的侵襲機制。此外，將該細胞與母系細胞構建混合培養模型，可模擬體內肝癌異質性微環境，用于評估聯合用藥的協同效應。
培養與保存規范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基，額外添加 2ng/ml 表皮生長因子（EGF）以維持亞型特性，抗生素濃度較母系細胞提高至 1.5%。培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度，培養基需每日更換以適應快速增殖需求。傳代時采用含 0.25% 胰dan白酶的消化液處理，37℃孵育 4-5 分鐘，待細胞wan全脫落後加入終止液，按 1:5-1:6 比例傳代，每 2-3 天傳代一次，維持細胞融合度在 60%-70% 以保持高增殖活性。凍存液配方為基礎培養基 + 12% DMSO+20% 胎牛血清，經程序降溫后液氮保存，復蘇存活率達 90%，2 代內即可恢復穩定增殖。運輸采用對數生長期活細胞運輸，收到后需立即更換新鮮培養基，靜置培養 12 小時后進行實驗操作。該細胞系僅限科研使用，操作需遵循腫瘤細胞生物安全管理規范。
H4-II-E-C3 大鼠肝細胞瘤細胞系以其du特的亞型特征、顯著的惡性表型及明確的分子標記，在肝癌亞型研究與精準醫學開發中具有不可替代的價值，為揭示肝細胞癌的亞型分化規律和開發亞型特異性治療方案提供了可靠的實驗平臺。
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