來源與克隆背景：該細胞系源自 1962 年分離的非洲綠猴腎原代細胞，1976 年通過有限稀釋法獲得單克隆衍生株（“76" 代表克隆年份）。篩選過程基于病毒敏感性與生長均一性指標，未引入外源基因，全基因組測序顯示其染色體數(shù)目為 60（近二倍體），與 Vero 親本細胞遺傳相似度＞98%，核型穩(wěn)定性在傳代 100 次內(nèi)畸變率＜3%，群體均一性優(yōu)于早期 Vero 混合株（流式檢測細胞周期同步率提升 25%）。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈典型上皮樣形態(tài)，貼壁生長時呈多邊形，胞質(zhì)致密，細胞排列規(guī)則呈單層；懸浮培養(yǎng)易脫落死亡，故以貼壁培養(yǎng)為主。37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 30-34 小時，適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基，傳代 80 次以上生長速率衰減＜12%，凍存復蘇后存活率超 85%，可在無血清培養(yǎng)基中馴化（6-8 周適應(yīng)期），細胞密度可達 4×10?個 /cm2。

功能特征：核心優(yōu)勢在于病毒親和性與復制支持能力：狂犬病毒糖蛋白受體（如 nAChR）表達量較普通 Vero 細胞高 2 倍（免疫熒光檢測），感染后 72 小時病毒滴度可達 10?-10? FFU/mL；對單純皰疹病毒（HSV）的敏感性表現(xiàn)為快速出現(xiàn)細胞病變（CPE），48 小時內(nèi)病變率達 90%，顯著短于其他猴腎細胞系。同時，其缺乏干擾素合成能力（IFN-β 分泌量＜0.5pg/mL），可避免病毒復制被宿主免疫機制抑制，保障高滴度病毒產(chǎn)出。

貼壁培養(yǎng)操作：

病毒培養(yǎng)流程：

凍存流程：取對數(shù)生長期細胞，1000rpm 離心 5 分鐘，凍存液（70% MEM+20% 胎牛血清 + 10% DMSO）重懸至 6×10?個 /mL，分裝凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜后移至液氮，保存期超 5 年，復蘇后傳代 2 次再用于病毒實驗（確保受體表達穩(wěn)定）。

優(yōu)勢：對狂犬病毒、皰疹病毒敏感性ji高（滴度較普通 Vero 細胞高 1-2 個數(shù)量級）；遺傳背景穩(wěn)定，實驗重復性好（CV＜7%）；符合 GMP 標準，無內(nèi)源性病毒污染；可適應(yīng)無血清培養(yǎng)，便于工業(yè)化生產(chǎn)；病毒復制周期短，實驗效率高。

局限性：對非包膜病毒（如腺病毒）敏感性較低；長期傳代（＞100 次）可能出現(xiàn)病毒受體表達下調(diào)（約 10%）；貼壁依賴性強，懸浮培養(yǎng)難度高于 CHO 細胞；缺乏干擾素系統(tǒng)，可能影響藥物體內(nèi)外活性相關(guān)性。