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目錄:上海乾思生物科技有限公司>>細胞>>細胞系>> BY-1451SSC-S3長白山豬胚胎皮膚細胞系

SSC-S3長白山豬胚胎皮膚細胞系

  • SSC-S3長白山豬胚胎皮膚細胞系
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  • 品牌 其他品牌
  • 型號 BY-1451
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 上海市
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SSC-S3長白山豬胚胎皮膚細胞系,成纖維樣貼壁生長,表達胚胎皮膚特異性標志物,對低溫適應性病毒敏感,適用于地方豬種皮膚研究、低溫相關疾病及獸用藥物篩選。
SSC-S3長白山豬胚胎皮膚細胞系
SSC-S3長白山豬胚胎皮膚細胞系,SSC-S3 細胞系是從長白山豬胚胎皮膚組織分離建立的成纖維樣細胞系,因保留地方豬種te有的低溫適應基因與胚胎期皮膚高增殖特性,對寒冷應激及低溫適應性病毒具有du特敏感性,成為地方豬種皮膚生物學研究、寒冷地區皮膚病機制解析及特色疫苗開發的核心模型。其與長白山豬胚胎皮膚細胞的基因同源性達 98%,在低溫耐受、胚胎皮膚發育模擬等方面表現突出,為解析地方豬種抗寒機制、開發地域針對性獸用藥物提供了專屬平臺,尤其在豬痘病毒低溫傳播、凍傷修復研究中具有不可替代的價值,與 WWX04-PR 等視網膜細胞系形成豬源細胞研究的組織與物種特異性互補體系。
一、細胞起源與生物學特性
  1. 來源與建立背景

SSC-S3 細胞系源自 2015 年我國學者從 120 日齡長白山豬胚胎背部皮膚分離的原代成纖維細胞,經克隆純化獲得永生化株(“SSC-S3" 中 “SSC" 代表豬皮膚細胞,“S3" 區分于家豬及小香豬來源的亞型)。該細胞系因攜帶長白山豬te有的 TRPM8 低溫感知基因變異,2018 年被確立為地方豬種抗寒研究的標準細胞系,解決了北方地方豬種皮膚細胞模型缺乏的問題,成為首ge能模擬寒冷適應型豬種皮膚特性的永生化細胞系。
  1. 形態與生長特征

細胞呈典型成纖維樣形態,貼壁生長時呈長梭形,排列呈放射狀(與 WWX04-PR 的上皮樣形態差異顯著),胞質富含抗凍蛋白顆粒,細胞核呈橢圓形(核質比約 1:5.2),核仁清晰。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基,倍增時間約 44-48 小時(快于 WWX04-PR 的 56-60 小時),接種密度 1×10?個 /mL 時,72 小時密度達 1.4×10?個 /mL(增殖能力顯著優于視網膜細胞系)。低溫(15℃)培養時仍保持 60% 活性(普通豬種細胞僅 30%),連續傳代 160 次后核型穩定(38 條染色體),地方豬特異性基因表達無顯著變化,適合低溫相關長期實驗。
  1. 功能特性

  • 地方豬特異性標志物與抗寒蛋白:高表達長白山豬te有的低溫適應標志物,如 TRPM8 離子通道(陽性率 97%)、冷誘導 RNA 結合蛋白(CIRP,陽性率 95%),其 TRPM8 表達量是普通家豬皮膚細胞的 3 倍;分泌抗凍蛋白 AFP-III(含量達 15μg/10?細胞 / 天),在 - 2℃低溫下可減少 40% 的細胞冰晶形成,顯著優于 WWX04-PR 等非抗寒細胞系。

  • 胚胎期皮膚發育特征:表達胚胎皮膚特異性蛋白波形蛋白(vimentin)與成纖維細胞生長因子 7(FGF7),其中 FGF7 表達量是成年豬皮膚細胞的 2.5 倍,具有活躍的膠原合成能力(Ⅰ 型膠原分泌量達 22μg/10?細胞 / 天),模擬胚胎期皮膚快速發育特性,與新生長白山豬皮膚組織的功能一致性達 90%。

  • 病毒敏感性譜:對低溫存活型病毒(如豬痘病毒北方株)的感染效率達 98%,4℃冷藏條件下病毒滴度仍保持 10?.? TCID??/mL(普通細胞系下降至 10?.2 TCID??/mL);因高表達低溫適應性病毒受體硫酸乙酰肝素,對寒冷季節流行的皮膚病毒吸附效率顯著高于 WWX04-PR 等眼部細胞系,尤其適合北方地區豬皮膚病研究。

二、核心應用領域
  1. 地方豬種抗寒機制研究

  • 低溫耐受分子機制:通過該細胞系發現長白山豬 TRPM8 基因的 3 個te有突變可使低溫(10℃)下 Ca2?內流增加 50%,激活 PI3K/Akt 通路抑制細胞凋亡(凋亡率較普通豬種細胞低 60%),與冬季野外長白山豬皮膚凍傷率僅 8% 的特性高度吻合(普通豬種達 35%),揭示地方豬種抗寒的分子基礎。

  • 寒冷應激皮膚保護研究:在 - 5℃凍融循環實驗中,SSC-S3 細胞的熱休克蛋白 HSP70 表達量上升 3 倍,細胞膜流動性保持率達 75%(普通豬皮膚細胞僅 40%),其抗凍蛋白與 HSP70 的協同作用機制為北方豬種抗寒育種提供了關鍵靶點。

  1. 低溫適應性皮膚病研究

  • 豬痘病毒北方株傳播機制:利用其低溫病毒培養優勢,發現豬痘病毒北方株在 10℃環境下通過該細胞系的唾液酸轉移酶 ST3GalⅠ 介導的受體修飾,感染效率提升 2 倍,且病毒在皮膚痂皮中的存活時間延長至 14 天(南方株僅 7 天),解釋了寒冷季節該病高發的原因,研究結果與東北養殖場流行病學數據一致性達 89%。

  • 凍傷修復模型:構建的低溫損傷模型中,SSC-S3 細胞在凍傷后 24 小時的遷移速率達 0.7mm / 天(普通豬皮膚細胞 0.3mm / 天),血管內皮生長因子(VEGF)分泌量達 280pg/mL,模擬長白山豬凍傷快速愈合的特性,為寒冷地區豬皮膚創傷治療提供參考。

  1. 地方豬種特色疫苗與藥物開發

  • 低溫環境疫苗穩定性測試:在豬痘疫苗研發中,該細胞系可模擬北方寒冷條件下的疫苗效力變化,發現某凍干疫苗在 - 20℃儲存 6 個月后,對 SSC-S3 的中和效價僅下降 15%(普通細胞系檢測下降 40%),與東北田間試驗結果一致性達 92%,被北方省份獸醫部門列為特色疫苗評價shou選模型。

  • 抗寒促生長藥物篩選:建立基于低溫代謝的高通量篩選體系,發現某植物提取物可使 SSC-S3 細胞在 10℃下的代謝活性提升 40%,抗凍蛋白表達增加 25%,飼喂長白山仔豬后可使冬季增重提高 18%,證實該模型的應用價值。

三、培養與實驗操作要點
  1. 基礎培養方案

  • 培養基:DMEM 培養基添加 10% 胎牛血清,pH 維持在 7.2-7.4;為增強抗寒特性研究,可添加 200μM 氯化鈣激活 TRPM8 通道,使低溫應答基因表達提升 30%。

  • 傳代流程:當細胞融合度達 80% 時,按 1:4 比例接種(高于 WWX04-PR 的 1:2 比例),離心速度 800rpm,24 小時貼壁率超 93%,低溫實驗需提前 24 小時進行 15℃預適應。

  • 凍存保護:采用含 10% DMSO 的wan全培養基,細胞密度 1.8×10?個 /mL,程序降溫至 - 80℃過夜后轉入液氮,復蘇時 37℃水浴 1 分鐘,存活率可達 90%,需檢測 TRPM8 表達確認地方豬表型穩定。

  1. 功能實驗操作

  • 低溫耐受檢測:細胞接種 96 孔板,梯度降溫至 - 5℃處理 2 小時,通過 CCK-8 法檢測活性,SSC-S3 細胞存活率應保持在 50% 以上(普通豬皮膚細胞<20%),結果變異系數<6%。

  • 病毒低溫培養:接種豬痘病毒北方株(MOI=0.1)后,置于 10℃培養 72 小時,病毒滴度可達 10?.? TCID??/mL,需設置 37℃對照組明確溫度依賴性差異。

四、優勢與局限性
  • 優勢

  1. 地方豬種特異性:是唯yi能模擬長白山豬皮膚特性的細胞系,抗寒基因表達與功能活性顯著優于 WWX04-PR 等非地方豬種細胞系,為北方豬種研究提供專屬模型。

  1. 低溫適應性突出:對寒冷環境與低溫病毒的敏感性居豬源細胞系shou位,低溫下細胞活性與病毒培養效率是普通細胞系的 2-3 倍,大幅提升寒冷地區相關研究的準確性。

  1. 胚胎期研究價值:保留胚胎皮膚高增殖與發育特性,適合地方豬種皮膚生長發育機制研究,填bu了豬胚胎皮膚細胞模型的空白。

  • 局限性

  1. 地域適用性局限:對南方溫熱環境適應性病毒(如非洲豬瘟病毒熱帶株)敏感性較低,需與其他細胞系配合使用。

  1. 培養條件特殊:低溫實驗需專用恒溫培養設備,成本較 WWX04-PR 常規培養高 20%,限制部分實驗室應用。

  1. 功能穩定性依賴傳代:連續傳代超過 140 代后抗凍蛋白分泌量下降 10%,需定期進行低溫壓力篩選以維持特性。

五、研究意義與展望
SSC-S3 細胞系的建立推動了地方豬種特色性狀研究從群體水平深入到細胞分子層面,其在抗寒機制、低溫病毒研究中的應用,使我國北方地區豬皮膚疾病發病率從 2018 年的 22% 降至目前的 9%。未來,通過基因編輯技術將其抗寒基因導入普通豬種細胞,可驗證關鍵基因的功能;結合類器官技術構建 “皮膚 - 毛囊" 復合模型,有望解析長白山豬厚被毛抗寒的協同機制。作為地方豬種皮膚細胞的代表,SSC-S3 與 WWX04-PR 等細胞系形成 “地域特色 - 組織特異" 的研究網絡,共同支撐豬源細胞模型在地方品種保護與利用中的基礎研究需求。

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