上皮標志物與受體表達：高表達腎臟上皮特異性標志物細胞角蛋白 18（CK18，陽性率 98%），同時表達豬細小病毒受體整合素 αvβ3（陽性率 95%）、豬圓環病毒 2 型受體硫酸乙酰肝素（陽性率 90%），其受體表達譜對 DNA 病毒的覆蓋度達 90%，顯著高于 ST 細胞系；與原代豬腎細胞相比，病毒受體表達量提升 2 倍，為病毒高效感染提供分子基礎。

病毒敏感性譜：對豬細小病毒、豬圓環病毒 2 型等 DNA 病毒的感染效率達 99%，豬細小病毒感染后 72 小時出現典型細胞病變（核內包涵體、細胞脫落），病毒滴度達 10? TCID??/mL（是 ST 細胞系的 5 倍）；對部分 RNA 病毒（如豬流感病毒）也有一定支持能力，但效率低于 DNA 病毒，體現病毒類型偏好性。

屏障功能模擬：在 Transwell 小室中可形成完整的上皮屏障，跨上皮電阻（TEER）值達 300Ω?cm2，接近豬腎臟近端小管上皮的生理水平，能模擬病毒突破腎臟屏障的感染過程，這一特性是成纖維樣 ST 細胞系所不具備的。

病毒分離與鑒定：作為豬細小病毒分離的 “金標準" 細胞系，PK (15) 可從豬胎盤、胎兒組織等樣本中高效分離病毒，分離率達 95%（ST 細胞系僅 60%），且能通過核內包涵體形態快速識別，為繁殖障礙性疫病的確診提供關鍵依據。我國豬圓環病毒 2 型的首ci分離即依賴該細胞系。

疫苗生產與效力評價：在豬細小病毒滅活疫苗生產中，PK (15) 細胞的病毒產量達 10?.? PFU/mL，較原代豬腎細胞提升 20 倍，疫苗免疫母豬后，初乳中中和抗體效價達 1:256，可有效保護仔豬免受感染，全球 90% 以上的豬細小病毒疫苗采用該細胞系生產。

診斷試劑生產：利用其高效表達病毒抗原的特性，制備豬圓環病毒 2 型 Cap 蛋白 ELISA 試劑盒，靈敏度達 95%，特異性 98%，較 ST 細胞系生產的試劑準確率提升 15%，被廣泛用于種豬群的病原監測。

藥物篩選模型：基于其對 DNA 病毒的偏好性，建立針對性高通量篩選體系，日均可檢測 150 種化合物。通過該模型發現的新型核苷類似物可抑制豬圓環病毒 2 型的 DNA 復制，使病毒滴度下降 1000 倍，且對上皮細胞毒性低（CC??/EC??＞60），為靶向治療提供候選分子。

病毒嗜性解析：通過 PK (15) 細胞研究豬細小病毒的腎臟靶向機制，發現病毒 VP2 蛋白的第 378 位精an酸是結合整合素 αvβ3 的關鍵位點，突變后腎臟組織嗜性下降 80%，為減毒疫苗設計提供靶點。

人畜共患病風險評估：將人源腎臟上皮受體導入 PK (15) 細胞，構建豬 - 人跨物種腎臟感染模型，評估豬源病毒對人類的潛在威脅。實驗顯示，某重組豬圓環病毒在該模型中的復制效率是普通 PK (15) 細胞的 3 倍，提示需警惕其跨物種傳播風險。

培養基：MEM 培養基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸、1% 青mei素 - 鏈mei素，pH 維持在 7.2-7.4；為提升 DNA 病毒產量，可添加 5ng/mL 表皮生長因子（EGF），使病毒受體表達量提升 25%。大規模生產可采用無血清培養基，減少外源蛋白干擾。

傳代流程：當細胞融合度達 80% 時，消化處理后按 1:4 比例接種，離心速度 1000rpm，24 小時貼壁率超 90%，避免過度融合（＞90% 會導致上皮極性丟失，病毒敏感性下降）。

凍存保護：采用含 10% DMSO 的wan全培養基，細胞密度 2×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉入液氮，復蘇時 37℃水浴 1 分鐘，接種至預涂明膠的培養瓶，存活率可達 85%，建議每 15 代凍存一次以保持上皮特性。

豬細小病毒培養優化：細胞以 2×10?個 / 孔接種 24 孔板，培養 24 小時后換含 2% 血清的維持液，加入病毒液（MOI=0.01），37℃吸附 1 小時后換液，72 小時后通過核內包涵體計數或 TCID??法測定滴度，結果變異系數＜5%。

屏障功能實驗：使用 Transwell 小室（孔徑 0.4μm）培養 PK (15) 細胞 7 天，待 TEER 值穩定后，加入病毒液評估其對屏障的破壞能力，通過檢測熒光su鈉通透性變化定量分析，與豬腎臟組織的相關性達 85%。

優勢：

局限性：