RPMI-8226人多發性骨髓瘤細胞系
RPMI-8226人多發性骨髓瘤細胞系是研究多發性骨髓瘤（MM）的經典模型，因具備典型的漿細胞表型、穩定的單克隆蛋白分泌能力及藥物抗性特征，在 MM 發病機制、耐藥機制及靶向藥物研發中應用廣泛，為解析 MM 的 “克隆增殖 - 骨髓微環境互作" 雙重特征提供了可靠工具。
來源與背景：該細胞系于 1966 年從一名 53 歲女性 MM 患者的外周血中分離建立，雖源自外周血，但保留了豐富的漿細胞特征。與其他 MM 細胞系（如 U266）相比，其更貼近臨床 MM 的漿細胞分化表型，尤其適合研究 MM 細胞與骨髓基質細胞的相互作用，為探索 “漿細胞惡性增殖 - 骨髓微環境重塑" 提供了理想樣本，填bu了 MM 與骨髓微環境關聯研究模型的空白。其明確的外周血來源和長期傳代穩定性，使其成為 MM 血液播散與骨髓微環境研究的重要橋梁。
細胞特性：形態上呈圓形或橢圓形，懸浮生長，部分細胞因胞質黏附呈現輕微聚集，細胞質豐富，可見空泡（免疫球蛋白儲存特征），細胞核呈圓形或卵圓形，核仁明顯，核質比約 1:1.5，具有漿細胞的典型形態特征。核心特性為單克隆蛋白分泌功能，持續分泌 IgG 型單克隆免疫球蛋白，培養基中可檢測到較高濃度的單克隆蛋白，這一特性使其成為研究 MM 蛋白代謝及相關并發癥（如高黏滯綜合征）的理想模型；漿細胞標志物表達，高表達 CD138（ Syndecan-1）、CD38，弱表達 CD45，不表達 B 細胞標志物 CD20，符合漿細胞的分子表型；中等增殖與耐藥能力，體外培養時細胞倍增時間約 48-60 小時，克隆形成率約 40%，對常規hua療藥物（如 melphalan）存在一定抗性，耐藥指數是敏感細胞系的 2-3 倍，其耐藥特性與臨床 MM 患者的治療抵抗現象高度吻合。傳代時無需消化處理，直接吹打懸浮細胞即可，傳代比例 1:2-1:4，連續傳代 50 次后仍保持單克隆蛋白分泌能力，但分泌量可能下降 10%-15%。
培養條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基，添加 2mM 谷an酰胺、10mM HEPES 和 1% 抗菌混合液以維持細胞活性。培養環境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養基，細胞密度維持在 1×10?-5×10?個 /ml 之間，密度過高會導致細胞聚團并影響活性。與貼壁細胞系不同，其對振蕩較敏感，培養過程中應避免劇烈晃動，傳代時通過離心（1000rpm，5 分鐘）收集細胞，用新鮮培養基重懸后接種，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復蘇后存活率可達 80% 以上，復蘇后 24 小時即可恢復正常增殖及蛋白分泌功能。
檢測鑒定：經微生物篩查，無支原體、細菌、真菌及常見病毒污染，符合實驗細胞質量標準。流式細胞術檢測顯示，CD138 陽性率超過 90%，CD38 陽性率超過 85%，CD45 陽性率約 10%-20%，符合漿細胞的免疫表型特征。蛋白分泌檢測證實其持續分泌 IgG 型單克隆蛋白，培養基中 IgG 濃度可達 5-10μg/ml/10?細胞 / 24 小時。染色體核型分析呈現亞二倍體核型，存在 14 號染色體易位 [t (14;16)] 等異常，與約 20% 的 MM 患者遺傳學改變吻合，該易位導致 MAF 原癌基因過表達，與細胞增殖及耐藥性相關。功能驗證實驗中，與骨髓基質細胞共培養后，其增殖速率提升 30%-50%，證實其對骨髓微環境的依賴性，模擬臨床 MM 細胞在骨髓中的生長特征。
應用領域：在發病機制研究中，該細胞系常用于解析 MM 的克隆增殖機制，研究發現其高表達 IL-6 受體，IL-6 可通過激活 JAK/STAT3 通路促進其增殖，阻斷該通路可顯著抑制細胞生長，為理解 MM 的 “細胞因子依賴型增殖" 提供了關鍵線索。在耐藥機制研究方面，適用于探索 MM 的藥物抵抗原因，通過建立耐藥亞株發現，ABC 轉運蛋白（如 ABCB1）過表達及凋亡通路異常（如 Bcl-2 高表達）是其耐藥的重要機制，為逆轉耐藥提供潛在靶點。在藥物篩選方面，是評估 MM 治療藥物的常用模型，通過檢測藥物對其增殖、凋亡及蛋白分泌的影響，篩選能有效抑制 MM 細胞的候選藥物，如蛋白酶體抑制劑可顯著誘導其凋亡，且與免疫調節劑聯用具有協同效應。此外，該細胞系可用于研究 MM 與骨微環境的相互作用，其分泌的破骨細胞活化因子（如 RANKL）可誘導破骨細胞分化，導致骨吸收增強，模擬臨床 MM 的骨病特征，為研究 MM 骨病機制提供實驗基礎。
該細胞系的優勢在于能穩定維持漿細胞表型及單克隆蛋白分泌功能，為研究 “MM 細胞 - 骨髓微環境互作" 提供了理想模型。通過與其他 MM 細胞系（如 U266）的對比實驗，可清晰區分不同 MM 亞型在增殖、耐藥及微環境依賴性上的差異，為 MM 的精準治療提供實驗依據。
總之，RPMI-8226 人多發性骨髓瘤細胞系憑借其典型的漿細胞特征、穩定的生物學特性及與臨床 MM 的高度吻合性，成為 MM 基礎研究與臨床轉化的重要工具，為解析 MM 的發病機制、開發新型治療藥物及優化治療方案提供了堅實的實驗基礎。
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