G401人腎癌Wilms細胞系
G401人腎癌Wilms細胞系是研究 Wilms 瘤(腎母細胞瘤)的經典模型,因保留了胚胎性腎組織的分化特征和典型的腫瘤生物學行為,在 Wilms 瘤發病機制、胚胎發育異常及藥物研發中具有不可替代的地位,為解析這一兒童常見惡性腎臟腫瘤的生物學特性提供了可靠工具。
來源與背景:該細胞系于 1970 年從一名 11 個月大的 Wilms 瘤患兒的原發腫瘤組織中分離建立,屬于胚胎性腎母細胞瘤亞型。與其他腎臟腫瘤細胞系相比,其更能模擬 Wilms 瘤的胚胎源性特征,尤其適合研究腎臟胚胎發育異常與腫瘤發生的關聯,為探索這一腫瘤的起源提供了理想樣本,填bu了兒童腎臟胚胎性腫瘤研究模型的空白。
細胞特性:形態上呈上皮樣與梭形混合,細胞排列松散,部分區域呈巢狀生長,細胞質豐富,可見幼稚腎組織樣結構,細胞核大且形態不規則,核仁明顯,具有胚胎性腫瘤細胞的典型形態特征。核心特性為胚胎性分化潛能,表達 WT1(Wilms 瘤抑制基因)、CK18(細胞角蛋白 18)等胚胎腎組織標志物,在特定誘導條件下可向腎上皮樣細胞方向分化,模擬腎臟胚胎發育過程;強增殖能力,體外培養時增殖速度較快,細胞倍增時間約 36-40 小時,克隆形成率高,高表達增殖相關蛋白,在裸鼠模型中可形成快速生長的腫瘤結節。傳代時用常規消化液處理即可,傳代比例 1:5-1:7,連續傳代 40 次后仍保持穩定的生物學特性。
培養條件:采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基,添加 1% 非必需氨基酸和 2mM 谷an酰胺以維持細胞活性。培養環境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度,每 2-3 天更換一次培養基,細胞密度維持在 20%-60% 之間,避免過度匯合抑制胚胎性分化特征。與其他腎臟腫瘤細胞系不同,其對胰島素較為敏感,培養基中添加胰島素可促進細胞增殖并維持 WT1 表達,傳代時用常規消化液處理 3-4 分鐘,輕柔吹打以獲得單細胞懸液,防止劇烈操作破壞細胞間的巢狀結構。
檢測鑒定:經微生物篩查,無支原體、細菌、真菌及常見病毒污染,符合實驗細胞質量標準。免疫組織化學檢測顯示,WT1、CK18 呈強陽性表達,波形蛋白(vimentin)部分陽性,符合 Wilms 瘤的分子特征。染色體核型分析呈現亞三倍體核型,存在 11 號染色體缺失(與 WT1 基因定位相關)、12 號染色體三體等異常,與臨床 Wilms 瘤患兒的遺傳學改變高度吻合。動物成瘤實驗中,裸鼠皮下接種成瘤率 100%,腫瘤組織可見類似腎母細胞瘤的幼稚腎小球樣結構,能模擬原發灶的病理特征。
應用領域:在發病機制研究中,該細胞系常用于解析 WT1 基因的功能異常與 Wilms 瘤發生的關系,研究發現其 WT1 基因存在異常剪接變體,導致抑癌功能缺失,為理解 Wilms 瘤的分子機制提供了關鍵線索。在胚胎發育研究中,可用于探索腎臟胚胎發育的調控網絡,通過檢測其分化過程中基因表達變化,發現 Wnt/β-catenin 通路在腎上皮分化中起重要作用,為解析腎臟發育異常提供了實驗依據。在藥物篩選方面,適用于評估抗 Wilms 瘤藥物的療效,通過檢測藥物對細胞增殖及 WT1 表達的影響,篩選能抑制胚胎性腫瘤細胞生長的候選藥物,如某些靶向增殖信號通路的抑制劑可顯著降低其增殖活性。此外,該細胞系可用于研究腫瘤微環境對 Wilms 瘤的影響,其與腎臟基質細胞的共培養可促進腫瘤細胞的胚胎性特征維持,為靶向腫瘤微環境的治療策略提供實驗基礎。
該細胞系的du特優勢在于能穩定保留 Wilms 瘤的胚胎性分化特征,為研究兒童腎臟腫瘤的 “胚胎發育異常 - 腫瘤發生" 關聯提供了理想模型。通過與其他腎臟腫瘤細胞系(如 786-O)的對比實驗,可清晰區分胚胎性與成人腎臟腫瘤的生物學差異,為兒童 Wilms 瘤的個性化治療提供實驗依據。
總之,G401 人腎癌 Wilms 細胞系憑借其典型的胚胎性特征和穩定的腫瘤生物學行為,成為連接 Wilms 瘤基礎研究與臨床轉化的重要橋梁,為解析這一兒童常見腎臟腫瘤的發病機制、開發新型治療藥物及優化臨床治療方案提供了堅實的實驗基礎。
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