MML小鼠肺成纖維細胞系
在呼吸系統(tǒng)疾病研究與組織修復機制探索領域,MML小鼠肺成纖維細胞系憑借其典型的成纖維細胞特征與穩(wěn)定的體外功能,成為研究肺纖維化、肺部炎癥及肺組織再生的重要實驗模型,為解析肺部疾病的病理生理過程提供了可靠的細胞平臺。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自 C57BL/6 小鼠的正常肺組織,經原代培養(yǎng)與純化建立。細胞形態(tài)呈現典型的成纖維細胞特征,多為長梭形或星形,胞質豐富,細胞核呈橢圓形,位于細胞中央,核仁清晰。細胞排列疏松,生長過程中呈放射狀或漩渦狀分布,具有明顯的貼壁生長特性,傳代后 24 小時貼壁率達 95%。核心參數表現穩(wěn)定:qun體倍增時間約 24-28 小時,連續(xù)傳代 40 次后仍保持正常的二倍體核型(40 條染色體,XX 性別決定);成纖維細胞特異性標志物波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色呈強陽性,而角蛋白(Cytokeratin)染色陰性,純度達 96%;無細菌、真菌、支原體及病毒污染,保障了實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在肺纖維化機制研究中,MML 細胞在轉化生長因子 -β1(TGF-β1)誘導下可向肌成纖維細胞轉化,α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達量顯著上調,膠原分泌量增加 2.3 倍,模擬了肺纖維化過程中的關鍵病理變化,為篩選抗纖維化藥物提供了理想模型。在肺部炎癥研究方面,該細胞系對脂多糖(LPS)刺激敏感,可大量分泌腫瘤壞死因子 -α(TNF-α)、白細胞介素 - 6(IL-6)等炎癥因子,24 小時分泌量分別達 85pg/ml 和 120pg/ml,適用于探究肺部炎癥的調控網絡。此外,在肺組織修復研究中,MML 細胞具有促進上皮細胞遷移的能力,劃痕愈合實驗顯示其條件培養(yǎng)基可使肺上皮細胞 24 小時愈合率提高 40%,為研究肺損傷后的修復機制提供了重要工具。
培養(yǎng)與保存規(guī)范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培養(yǎng)基,添加 1% 抗生素混合液預防污染,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。傳代時采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化,待細胞形態(tài)變圓、間隙增大時終止消化,傳代比例為 1:3-1:5,每 3-4 天傳代一次,避免細胞融合度過高(超過 80%)導致的功能改變。凍存液配方為基礎培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% FBS,經程序降溫后存入液氮,復蘇后細胞存活率可達 90% 以上,3 代內即可恢復正常增殖能力。運輸方式可選擇干冰凍存管運輸或 T-25 培養(yǎng)瓶活細胞運輸,收到細胞后需立即更換培養(yǎng)基,觀察 24 小時確認細胞狀態(tài)良好后再進行后續(xù)操作。該細胞系僅限科研使用,禁止用于臨床診療相關研究。
MML 小鼠肺成纖維細胞系以其穩(wěn)定的生物學特性、明確的功能表型及便捷的培養(yǎng)條件,在肺部疾病基礎研究與藥物研發(fā)中發(fā)揮著重要作用,為揭示肺組織穩(wěn)態(tài)調控機制與開發(fā)新型治療策略提供了有力支撐。
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