RNEEC/HL-036大鼠正常子宮內膜細胞系
RNEEC/HL-036大鼠正常子宮內膜細胞系作為源自大鼠子宮內膜組織的正常上皮細胞模型,因保留子宮內膜的周期性增殖分化特性及激素響應功能,在子宮內膜周期性變化機制、子宮修復及相關婦科疾病研究中具有重要價值,成為探究子宮內膜生理功能及相關疾病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠子宮內膜增殖期組織,經原代培養和純化獲得。細胞形態呈上皮樣,多為立方形或短柱狀,胞體大小均勻(直徑約 15-20μm),胞質豐富且呈嗜酸性,可見細小的分泌顆粒,細胞核呈圓形或橢圓形,位于細胞基底部,核仁清晰。生長方式為貼壁生長,呈單層鋪路石樣排列,具有明顯的接觸抑制現象,傳代后 24 小時貼壁率達 92%。核心參數表現出正常子宮內膜細胞特征:倍增時間約 68 小時,連續傳代 18 次后仍保持穩定的生物學特性;表面標志物表達du特,細胞角蛋白 19(CK19)陽性率達 96%,上皮細胞黏附分子(EpCAM)陽性率 94%,雌激素受體 α(ERα)陽性率 92%,孕激素受體(PR)陽性率 89%;具有正常的二倍體核型(染色體數 42 條),無染色體畸變;能分泌層粘連蛋白,基礎分泌量達 50ng/mL,在雌激素刺激下分泌量可提升 2.3 倍;無微生物污染,細胞純度達 97%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在子宮內膜周期性變化研究中,RNEEC/HL-036 細胞經雌激素處理 5 天后,增殖活性提升 55%,Ki67 陽性率增加至 48%;再經孕激素處理 7 天后,細胞出現分泌期特征,糖原顆粒含量增加 3.2 倍,可模擬子宮內膜從增殖期向分泌期的轉化過程,為解析激素調控子宮內膜周期的機制提供理想模型。
在子宮內膜修復研究方面,該細胞經表皮生長因子(EGF)處理 48 小時后,遷移速率增加 60%,Ⅰ 型膠原蛋白分泌量提升 45%,創面愈合率達 78%,可模擬子宮內膜損傷后的修復過程,適用于探究子宮內膜修復的分子機制。
婦科疾病研究領域,該細胞在高濃度孕激素處理下,凋亡率增加 35%,ERα 和 PR 表達量分別下降 40% 和 45%,可模擬孕激素過多導致的子宮nei膜萎suo現象,為探究子宮內膜異位癥、閉經等疾病的發病機制提供實驗基礎。此外,該細胞與子宮內膜間質細胞共培養時,間質細胞的 α- 平滑肌肌動蛋白表達量增加 2.8 倍,可用于探究上皮 - 間質相互作用在子宮內膜蛻膜化中的調控機制。
培養與保存規范:推薦使用含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基,添加 10ng/mL 表皮生長因子(EGF)、1% 胰島素 - 轉鐵蛋白 - 硒混合液及 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2-3 天更換一次,以維持細胞的正常特性。傳代時,用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入專用細胞解離液,37℃孵育 10-12 分鐘,待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例為 1:2-1:3,每 6-7 天傳代一次,避免過度傳代導致激素響應能力下降。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,細胞濃度調整為 2.5×10?個 /ml,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇存活率達 86% 以上,3-4 代內可恢復正常的生長和激素響應功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物且排列整齊后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁更換培養條件,以防影響其周期性特性。
RNEEC/HL-036 大鼠正常子宮內膜細胞系以其穩定的子宮內膜特性、顯著的激素響應能力及良好的增殖分化潛能,在子宮內膜生物學研究與婦科疾病機制探索中發揮著重要作用,為揭示子宮內膜相關疾病的發病機制和開發新型治療藥物提供了可靠的細胞模型。
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