RBL-2H3大鼠嗜堿性細胞白血病細胞系
RBL-2H3大鼠嗜堿性細胞白血病細胞系在過敏反應(yīng)與免疫相關(guān)疾病研究領(lǐng)域ji具價值,憑借其模擬嗜堿性粒細胞和肥大細胞功能的特性,成為探究過敏機制、篩選抗敏藥物的關(guān)鍵實驗模型,為免疫相關(guān)研究提供了可靠的細胞平臺。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠嗜堿性粒細胞白血病組織,經(jīng)克隆化培養(yǎng)建立。細胞形態(tài)呈圓形或橢圓形,胞質(zhì)內(nèi)可見嗜堿性顆粒,細胞核呈圓形或腎形,位于細胞一側(cè),核仁不明顯。生長方式以半貼壁為主,部分細胞懸浮生長,傳代后 24 小時存活率達 91%。核心參數(shù)表現(xiàn)穩(wěn)定:倍增時間約 24-26 小時,連續(xù)傳代 50 次后仍保持異常染色體核型(染色體數(shù)約 44-48 條);高表達高親和力 IgE 受體(FcεRI),經(jīng)免疫熒光檢測呈強陽性,細胞純度達 94%;無細菌、真菌、支原體及病毒污染,確保實驗結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價值:在過敏反應(yīng)機制研究中,RBL-2H3 細胞經(jīng) IgE 致敏并受抗原刺激后,15 分鐘內(nèi)即可釋放組胺(釋放量達 350ng/10?細胞),同時分泌白三烯 C4 等炎癥介質(zhì),wan美模擬體內(nèi) Ⅰ 型超敏反應(yīng)的早期階段,為解析肥大細胞脫顆粒信號通路提供了理想模型。藥物篩選方面,該細胞對糖皮質(zhì)激素、抗組胺藥等經(jīng)典抗過敏藥物反應(yīng)敏感,經(jīng)地塞mi松處理后,組胺釋放量可降低 62%,適用于評估新型抗敏藥物的抑制效能及作用靶點。在免疫調(diào)節(jié)研究中,細胞可被脂多糖(LPS)激活,分泌腫瘤壞死因子 -α(TNF-α)、白細胞介素 - 6(IL-6)等細胞因子,24 小時分泌量分別達 85pg/ml 和 120pg/ml,為探究免疫細胞間的交叉調(diào)控機制提供了實驗工具。此外,將細胞與致敏小鼠血清共孵育,可建立體外過敏反應(yīng)模型,用于食品、環(huán)境過敏原的檢測與安全性評價。
培養(yǎng)與保存規(guī)范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基,添加 1% 抗生素混合液預防污染,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2 天更換一次,避免代謝廢物積累。傳代時采用輕柔吹打結(jié)合離心的方式,吸棄舊培養(yǎng)基后,用 PBS 輕洗細胞 1 次,加入新鮮培養(yǎng)基吹打制成懸液,按 1:3-1:4 比例接種,每 2-3 天傳代一次,維持細胞密度在 1×10?-5×10?個 /ml 之間。凍存液配方為基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% FBS,經(jīng)程序降溫后存入液氮,復蘇后細胞存活率達 88% 以上,48 小時內(nèi)可恢復正常的脫顆粒功能。運輸采用干冰凍存管或含專用運輸培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶,收到細胞后需靜置培養(yǎng) 6 小時再更換培養(yǎng)基,觀察細胞狀態(tài)穩(wěn)定后進行后續(xù)實驗。該細胞系僅限科研使用,禁止用于臨床診斷相關(guān)研究。
RBL-2H3 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞系以其穩(wěn)定的過敏反應(yīng)模擬能力、明確的功能特征及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢,在過敏機制研究與抗敏藥物研發(fā)中發(fā)揮著不可替代的作用,為推動免疫醫(yī)學領(lǐng)域的發(fā)展提供了重要支撐。
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