來源與構建：該細胞系以 CHO-S 細胞為親本，通過電穿孔轉染法導入含 TIM-1 胞外域（IgV 與黏蛋白結構域）與 IgG1 Fc 段的融合基因表達載體，經 Zeocin 抗性篩選及單克隆純化獲得穩定株，“TIM-1-Fc" 明確標識其表達的融合蛋白組成。構建過程中采用 CMV 啟動子驅動表達，結合信號肽優化序列，使融合蛋白分泌效率提升 30%，且 90% 以上以可溶性形式存在于培養上清中，便于純化與功能研究。

形態與增殖：體外培養呈上皮樣形態，可適應貼壁與懸浮兩種生長模式，懸浮培養時形成直徑 20-40μm 的松散聚集體，細胞輪廓清晰，活力長期維持在 90% 以上。在 37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 30-36 小時，適應無血清化學限定培養基（如 CD OptiCHO Medium），高密度培養時細胞密度可達 9×10?個 /mL，傳代 80 次以上仍保持穩定生長速率，融合蛋白表達量無明顯衰減，凍存復蘇后存活率超 85%。

表達特征：該細胞系分泌的 TIM-1-Fc 融合蛋白兼具 TIM-1 的病毒結合活性與 Fc 段的純化便利性：分子量約 65kDa（SDS-PAGE 檢測），TIM-1 部分可特異性結合病毒包膜蛋白（如流感病毒血凝素、登革病毒 E 蛋白），Fc 段可通過 Protein A 親和層析高效純化（純度超 98%）。其結合常數（KD）達 1.2×10?? M（針對流感病毒 H1N1 株），與天然 TIM-1 受體活性相當，且熱穩定性優異（4℃保存 30 天活性保留率超 90%）。

優勢：TIM-1-Fc 融合蛋白表達穩定，長期傳代后活性波動＜8%，實驗重復性強；融合蛋白兼具病毒結合與 Fc 段純化優勢，無需額外標簽即可高效分離；可懸浮高密度培養，蛋白產量達 3-4g/L（流加培養），降低原料生產成本；對多種病毒具有結合活性，適用范圍覆蓋呼吸道病毒、蟲媒病毒等，研究價值廣泛。

局限性：融合蛋白的 TIM-1 部分為倉鼠源，與人源 TIM-1 存在細微序列差異，部分人類病毒研究需結合人源化改造株；懸浮培養時聚集體過大會導致蛋白分泌效率下降，需控制攪拌速率（100-120 rpm）；對非 TIM-1 依賴型病毒無結合活性，應用范圍存在局限。

培養條件：懸浮培養推薦使用無血清化學限定培養基，添加 50μg/mL Zeocin 維持抗性篩選，37℃、5% CO?環境中攪拌培養。傳代時維持細胞密度在 2×10?-7×10?個 /mL，避免營養匱乏影響蛋白表達。流加培養階段，補加葡萄糖（維持濃度 4-6g/L）與氨基酸混合液，可延長蛋白分泌期至 14 天以上。

質控與安全：定期通過 Western blot 檢測融合蛋白表達，ELISA 驗證病毒結合活性；STR 鑒定排除交叉污染，支原體檢測需為陰性。凍存使用含 10% DMSO 的無血清凍存液，液氮保存可維持活性 5 年以上，復蘇后傳代 2 次待狀態穩定后用于實驗，涉及活病毒操作需符合生物安全二級標準。