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生化培養箱培養物質的制備保存

閱讀:1594        發布時間:2014-9-26
         一般實驗的對照有空白對照、陰性對照、實驗組、陽性對照??瞻讓φ站褪巧囵B箱培養基里面一點篩選因子都沒有,直接涂板,估計就是LZ做出來的樣子。陰性對照就是在篩選的培養基里面涂菌,一般不會長細菌。實驗組略過。陽性對照按照試驗組來做。

 

采樣用的容器使用前應蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置干燥箱160-170℃干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保存也很重要,如保存不當可使樣品中的大腸菌群細菌死亡或在一定條件下再生長,這些都將影響檢測結果的準確性。檢測室接到水樣后,應立即檢測,如因故不能檢測時,應立即將樣品置于冰箱內(2-10℃)并于2小時內檢測。

   

多管發酵法所使用的培養液在分裝于各發酵管中后,應將發酵管盡快放于高壓蒸汽滅菌器中,在115℃滅菌20min(注意:這個溫度也應控制好,既達到滅菌的作用,還要防止培養物質分解流失),然后貯存于冰箱或暗處備用。濾膜法所采用的M-FC培養基多使用外購的成品,培養基中苯胺藍的純度和質量往往影響菌落的顏色,因此,無菌包裝的成套培養基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對比菌落的顏色,來鑒定其穩定性。

 

結果統計多管發酵法的結果是根據不同接種量的發酵管所出現陽性結果的數目,從MPN表中查得相應的MPN指數,來計算每升水中糞大腸菌群細菌的MPN值。MPN是“Most Probable Number”的縮寫,指zui大可能數,它是根據統計學理論,估計水體中的菌群密度和衛生質量的一種方法,所以準確判斷不同接種量發酵管的陽性數是非常重要的,否則將導致較大偏差。濾膜法的結果是計數濾膜上呈藍或藍綠色的菌落,來計算出每升水樣中的糞大腸菌群數。所以為便于計數,減少誤差,理想的水樣體積是一片濾膜上生長20-60個糞大腸菌群菌落。

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