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熒光定量PCR技術服務
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  • 熒光定量PCR技術服務

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貨物所在地: 上海上海市
地: 上海
更新時間: 2025-02-03 21:00:07
期: 2025年2月3日--2025年8月3日
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產品簡介

實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到廣泛應用。 實時熒光定量PCR:在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

詳細介紹

實時熒光定量PCR技術(Real Time Quantitative PCR)

熒光定量PCR技術服務介紹:

實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到廣泛應用。
   實時熒光定量PCR:在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

 定量(Absolute Quantification,AQ)分析用于確定未知樣本中某個核酸序列的量值,即通常所說的拷貝數,應用與病原體檢測,轉基因食品檢測,及基因表達研究。

非特異性熒光標記:SYBR Green

SYBR Green特性:(1).只有和雙鏈DNA結合后才發熒光。(2).變性時,DNA雙鏈分開,無熒光。(3).在延伸結束階段采集熒光信號。(4).SYBR Green也能和非特異性的雙鏈DNA結合發光,所以必須在反應結束時做熔解曲線分析。

特異性熒光標記:

TaqMan探針的特性:(1).5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等 (2).3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)(3).探針完整,R所發射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發熒光(4).Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針

定量的標準樣品:

(1).含有和待測樣品相同擴增片段的克隆質粒(2).含有和待測樣品相同擴增片段的cDNA(3).PCR的產物,可分別做系列稀釋。

服務流程:

步驟

客 戶 提 供

服 務 內 容

基 屹 提 供

1

新鮮的且盡量多的材料;已知的全長基因序列;盡可能詳細的背景資料:DNA/ RNA來源、豐度等。

DNA/RNA提取,根據基因序列設計特異性的引物和熒光探針。


2

純化好的DNA/RNA(大于5 ug/樣品);已知的全長基因序列;盡可能詳細的背景資料:DNA/ RNA來源、豐度等。

根據基因序列設計特異性的引物和熒光探針。


3


以DNA為模板,對目的基因進行熒光定量PCR檢測分析

提供完整的定量分析結果、實驗熒光定量擴增曲線及詳細的實驗步驟。

注意:客戶可根據所能提供的起始材料不同,選擇從步驟1或2啟動項目。

我司分子生物學技術服務項目包括:
       熒光定量PCR,反轉錄熒光定量PCR檢測;PCR產物克隆,TA克隆,亞克??;RNAi干擾檢測;miRNA檢測;質粒載體構建等




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