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01加水
高壓蒸汽滅菌鍋先將排水閥關閉，調整總閥至“全排"。然后，開啟進水閥，放蒸餾水至蒸汽發生器內，待水進至距水表頂端大約1～2cm處時，關閉進水閥，并將總閥調至“關閉"。
02裝鍋
高壓蒸汽滅菌鍋將待滅菌物品裝入鍋內，注意不要塞得過緊過滿，盛有培養基的三角瓶和試管應立放或適度傾斜．以免滅菌過程中培養基污染棉塞。
03關門
高壓蒸汽滅菌鍋按順時針方向轉動緊鎖手柄，使撐擋進入門圈內。然后旋動八角轉盤，使門和墊圈密合，以滅菌時不漏氣為度，不宜太緊，以免損壞墊圈。
04通電加溫
高壓蒸汽滅菌鍋待電源控制開關的旋鈕旋至“開"處，電源指示燈亮，表示已通電，然后再按滅菌物品所需滅菌汽壓將旋切旋至0.07MPa、0.1mPa或0.14MPs處。此時電熱指示燈亮，表示已通電加熱。
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