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熒光光譜基礎,熒光光譜儀的原理和應用

時間:2021/8/16閱讀:2810
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1.什么是熒光?
物體經過較短波長的光照,把能量儲存起來,然后緩慢發出較長波長的光,發出的這種光就叫熒光。物質在吸收入射光的過程中,光子能量傳遞給物質分子。分子被激發,電子從較低能級躍遷到較高能級,形成電子激發態分子。電子的激發態的多重態用2s+1表示,s為自旋角動量量子數的代數和,數值為0或1。分子中同一軌道里所占據的兩個電子必須具有相反的自旋方向,即自旋配對。分子中全部電子都自旋配對,即s=0,該分子處于單重態,用S表示。若分子吸收能量后電子躍遷過程中不發生自旋方向的變化,這時分子處于激發的單重態;若躍遷伴隨自旋方向改變,這時分子具有兩個自旋不配對的電子,即s=1,分子處于激發的三重態,符號T表示。符號S0、S1和S2分別表示分子的基態、第一和第二電子激發單重態,T1和T2則分別表示第一和第二電子激發三重態。
激發態的分子不穩定,可以通過輻射躍遷(熒光、磷光)和非輻射躍遷(振動弛豫、內轉換、外轉換、系間竄越)的失活過程返回基態。熒光是分子從第一激發單重態的振動能級躍遷到基態各振動能級時所產生的光子輻射,熒光輻射能比激發能量低,熒光波長大于激發波長。熒光發射時間為10-9~10-7s,多為S1→S0躍遷。磷光是分子從第一激發三重態的振動能級躍遷到基態各振動能級時所產生的光子輻射,磷光輻射能比熒光輻射能量低,磷光波長大于熒光波長。磷光發射時間為10-4~10s,多為T1→S0躍遷。
2.什么是熒光光譜?
任何熒光化合物都具有兩個特征光譜:激發光譜和發射光譜。激發光譜反映了某一固定的發射波長下所測量的熒光強度對激發波長的依賴關系;發射光譜反映了某一固定激發波長下所測量的熒光的波長分布。
熒光光譜能夠提供激發譜、發射譜、峰位、峰強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振度等信息,熒光分析定性和定量的基礎。
熒光光譜的特點:(1)Stokes位移。激發光譜與發射光譜之間有波長差,發射光譜波長比激發光譜波長長;(2)發射光譜的形狀與激發波長無關;(3)鏡像規則,熒光發射光譜與它的吸收光譜成鏡像對稱關系。
3.什么是熒光分析?
熒光分析就是基于物質的光致發光現象而產生的熒光的特性及其強度進行物質的定性和定量的分析方法。目前,也廣泛地作為一種表征技術來研究體系的物理、化學性質及其變化情況,例如生物大分子構象及性質的研究。
熒光光譜適用于固體粉末、晶體、薄膜、液體等樣品的分析。根據樣品分別選配石英池(液體樣品)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)。
熒光光譜分析可與顯微鏡耦合,獲得微區分析結果。熒光是無損傷、非接觸的分析技術,還可用于自動檢驗、批量篩分、遠程原位分析和活體分析。
熒光光譜已應用于很多不同領域,特別是需要無損、顯微、化學分析、成像分析的場合。無論是需要定性還是定量的數據,熒光分析都能快速、簡便地提供重要信息。


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