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奧林巴斯CKX53正置生物教學顯微鏡的使用技巧

時間:2025/2/11閱讀:259
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以下是奧林巴斯 CKX53 正置生物教學顯微鏡的一些使用技巧:


奧林巴斯CKX53顯微鏡樣品準備技巧

切片制作:如果觀察的是組織切片,切片要盡量切得薄而均勻,厚度一般在 5-10 微米左右,這樣光線更容易透過,圖像更清晰。例如觀察植物葉片的葉肉細胞,切片過厚會導致細胞重疊,難以看清細胞內部結構。

樣品固定與染色:對于細胞等樣品,固定可以防止細胞變形或移動,便于觀察。染色時要根據(jù)觀察對象選擇合適的染色劑和染色時間。如觀察細胞核時,可用甲基綠 - 吡羅紅染液,染色 5-10 分鐘,能使細胞核呈綠色,細胞質呈紅色,便于區(qū)分。


奧林巴斯CKX53顯微鏡光源調節(jié)技巧

根據(jù)樣品特性調節(jié):如果樣品本身顏色較淺或透明度較高,如透明的微生物或細胞,光源亮度應適當調低,避免光線過強導致圖像發(fā)白,失去細節(jié);對于顏色較深或不透明的樣品,則需要適當增加光源亮度。

調節(jié)色溫:可根據(jù)觀察需求調整色溫,一般來說,觀察活細胞等需要真實色彩還原的樣品時,選擇接近自然光的色溫;觀察熒光樣品時,可根據(jù)熒光顏色選擇合適的色溫來增強對比度。


奧林巴斯CKX53顯微鏡聚焦與成像技巧

低倍鏡找視野:先用低倍物鏡(如 4X 或 10X)找到樣品的大致位置和輪廓,將感興趣的區(qū)域移至視野中央,低倍鏡下視野范圍大,更容易找到目標。

高倍鏡調清晰:轉換到高倍物鏡(如 40X 或 100X)后,使用細調焦旋鈕緩慢調節(jié)焦距,使圖像達到最佳清晰度。在高倍鏡下,微小的焦距變化都會對圖像清晰度產生很大影響,所以調節(jié)要格外小心。

利用景深:對于有一定厚度的樣品,可以通過微調焦距,觀察樣品不同層面的結構,利用景深來獲取更多信息。


奧林巴斯CKX53顯微鏡觀察方法選擇技巧

明場觀察:適用于觀察具有明顯顏色和形態(tài)差異的樣品,如染色后的細胞、組織切片等。調整孔徑光闌可改變圖像對比度,縮小光闌可增加對比度,但會降低亮度。

相襯觀察:對于透明或折射率差異小的樣品,如活細胞,相襯觀察能將細胞的厚度、折射率等差異轉化為可見的明暗對比,更清晰地觀察細胞的形態(tài)和內部結構。使用時要將相襯環(huán)準確轉入光路,并調節(jié)聚光鏡和孔徑光闌。

熒光觀察:如果樣品進行了熒光標記,選擇合適的熒光激發(fā)塊和濾光片,根據(jù)熒光強度調節(jié) ND 濾鏡,避免熒光過強或過弱影響觀察效果。同時,要注意熒光的淬滅問題,盡量縮短觀察時間。


奧林巴斯CKX53顯微鏡圖像記錄與分析技巧

拍照參數(shù)設置:如果使用相機連接顯微鏡進行拍照,要根據(jù)樣品的亮度、顏色等設置合適的曝光時間、增益、白平衡等參數(shù),以獲得高質量的圖像。

圖像測量與分析:利用顯微鏡配套軟件中的測量工具,可對樣品的長度、面積、角度等進行測量。還可以進行圖像拼接、對比度調整、色彩平衡等處理,以便更好地展示和分析樣品特征。


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