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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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日本奧林巴斯生物教學(xué)顯微鏡CX23的應(yīng)用技術(shù)

時(shí)間:2025/2/20閱讀:210
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日本奧林巴斯生物教學(xué)顯微鏡 CX23 的應(yīng)用技術(shù)主要包括以下方面:


奧林巴斯CX23樣品制備技術(shù)

切片制備:對(duì)于動(dòng)植物組織等樣品,利用切片機(jī)切成幾微米到幾十微米厚的薄切片,如觀察植物葉片的葉肉細(xì)胞、動(dòng)物的肝臟組織等,切片后用載玻片和蓋玻片固定,必要時(shí)進(jìn)行染色,如用蘇木精 - 伊紅染色觀察細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)等結(jié)構(gòu)。

涂片制備:針對(duì)血液、微生物培養(yǎng)液等液體樣品,采用涂片法。將一滴樣品滴在載玻片上,用另一塊載玻片將樣品均勻涂抹開,干燥固定后用于觀察血細(xì)胞形態(tài)、細(xì)菌形態(tài)等。

裝片制備:對(duì)于洋蔥表皮細(xì)胞、草履蟲等微小的生物個(gè)體或器官,可直接放在載玻片上,滴加適量的水或固定液,蓋上蓋玻片制成裝片進(jìn)行觀察。


奧林巴斯CX23觀察技術(shù)

明場(chǎng)觀察:適用于觀察染色或本身具有顏色差異的樣品。如觀察經(jīng)過(guò)革蘭氏染色的細(xì)菌,可區(qū)分革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌;觀察經(jīng)番紅染色的植物細(xì)胞,能清晰看到細(xì)胞核、細(xì)胞壁等結(jié)構(gòu)。

低倍到高倍觀察:先使用 4 倍物鏡進(jìn)行低倍觀察,找到樣品大致位置和整體結(jié)構(gòu),再根據(jù)需要逐步切換到 10 倍、40 倍物鏡觀察更詳細(xì)結(jié)構(gòu),若要觀察細(xì)胞內(nèi)更細(xì)微結(jié)構(gòu),如線粒體等,可使用 100 倍油鏡,但需在樣品和物鏡之間滴加浸油以提高分辨率。

調(diào)節(jié)光源和焦距:通過(guò)調(diào)節(jié) LED 光源的亮度旋鈕,使樣品獲得均勻且合適的光照。利用粗調(diào)旋鈕進(jìn)行快速對(duì)焦,找到樣品大致圖像,再使用微調(diào)旋鈕進(jìn)行精細(xì)對(duì)焦,使圖像達(dá)到最清晰的狀態(tài)。


奧林巴斯CX23圖像記錄與分析技術(shù)

數(shù)碼成像:可連接數(shù)碼相機(jī)或數(shù)碼成像系統(tǒng),如奧林巴斯的 DP27 數(shù)碼相機(jī)等,將顯微鏡下觀察到的圖像拍攝下來(lái),方便后續(xù)分析和教學(xué)展示。

圖像分析:配合奧林巴斯的相關(guān)成像軟件,如 Olympus Stream 或 CellSens 等,對(duì)拍攝的圖像進(jìn)行測(cè)量、標(biāo)注、分析等操作,如測(cè)量細(xì)胞的大小、計(jì)算細(xì)胞的數(shù)量等。


奧林巴斯CX23特殊應(yīng)用技術(shù)

熒光觀察升級(jí):雖然 CX23 本身一般不具備熒光功能,但可通過(guò)添加熒光模塊,如廣州明慧的 UV-LED-MH 熒光模塊,實(shí)現(xiàn)熒光觀察,用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的熒光標(biāo)記物質(zhì)、觀察熒光染色的樣品等,如對(duì)細(xì)胞中的特定蛋白質(zhì)進(jìn)行熒光標(biāo)記后觀察其分布和定位。

簡(jiǎn)單的相差觀察:對(duì)于未染色的透明樣品,若需要觀察其細(xì)節(jié)結(jié)構(gòu),可通過(guò)更換相差物鏡和相差聚光鏡,利用相差技術(shù)使樣品的密度差異轉(zhuǎn)化為亮度差異,從而觀察到細(xì)胞內(nèi)部的一些細(xì)微結(jié)構(gòu),如細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器等。


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