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漆酶活性是如何檢測的？

閱讀：3732 發(fā)布時間：2021-3-12

漆酶是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。酶液的提取步驟：

1、細胞:按照細胞數(shù)量(10*個) :提取液體積(ml) 為500-1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液)，超聲波破碎細菌或細胞(冰浴，功率30% 或300W,超聲3s，間隔7s，總時間3min)，12000g 4C離心10min,取上清，置冰上待測。

2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(ml) 為1:5-10 的比例(建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液)，進行冰浴勻漿; 1000g 4C離心10min,取上清，置冰上待測。

3、培養(yǎng)液:直接待檢。

漆酶活性檢測試劑盒測定漆酶活性是利用漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS，測定ABTS自由基的增加速率，可計算得漆酶活性。