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BC0180-半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒
  • BC0180-半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒
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地: 北京

更新時間:2025-03-23 21:00:07

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半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒
蛋白質含有三種含硫氨基酸:甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中,Cys是一種含有巰基的含硫氨基酸,從甲硫氨酸轉化而來,并且可與胱氨酸互相轉化。Cys參與蛋白質二硫鍵的形成,經常是蛋白質活性中心的組成部分,還可以為其它生理生化反應提供巰基。此外,Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面,在角蛋白生成中維持重要的巰基酶的活性,并且補充巰基,以維持皮膚的正常代謝,調節表皮下層的

半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒

一、半胱氨酸提取 : 1、 液體樣品中半胱氨酸提取:取 0.1mL 液體樣品,加試劑一 0.9mL,充分混勻,11000 rpm 4℃離心 10min,取上清液,待測。 2、 組織中半胱氨酸提取:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進行冰浴勻漿,11000 rpm 4℃離心 10 min,取上清液待測。 3、 細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(10 4個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);11000rpm,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。二、測定操作: 1. 分光光度計預熱 30 min 以上,調節波長到 600 nm,蒸餾水調零。 2. 空白管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 100 μL 蒸餾水,500μL 試劑二,500μL 試劑三,混勻后室溫靜置 15 min,于 600nm 處測定吸光值,記為 A 空白管。 Solarbio Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd /82 Http://www.solarbio。。com 3. 標準管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 100 μL 標準液,500μL 試劑二,500μL 試劑三,混勻后室溫靜置 15 min,于 600nm 處測定吸光值,記為 A 標準管。 4. 測定管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 100 μL 上清液,500μL 試劑二,500μL 試劑三,混勻后室溫靜置 15 min,于 600nm 處測定吸光值,記為 A 測定管。

半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒

半胱氨酸含量計算: 1. 按液體樣品的體積計算:半胱氨酸含量(μmol/mL)=[C 標準品×V 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]×(V 樣總÷V 樣)=1×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) 2. 按樣本質量計算:半胱氨酸含量(μmol/g)=[C 標準品×V 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]×(V 樣總÷V 樣)÷W=1×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷W 3. 按照蛋白濃度計算:半胱氨酸含量(μmol /mg prot)= [C 標準品×V 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]÷(V 樣×Cpr)=1×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷Cpr 4. 按細胞數量計算:氨基酸含量(μmol /10 4 cell)=[C 標準品×V 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)] ×(V 樣總 ÷V 樣×細胞數量)=1×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷細胞數量 C 標準品:標準品濃度,1μmol/mL;V 標準品:反應體系中加入標準品體積,0.1 mL;V 樣:反應體系中加入樣品提取液體積,0.1 mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL。W:樣品質量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL。

半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒

試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。試劑二:液體×1 瓶,4℃保存。試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存。用前 1 天,向試劑三中加 5 mL 蒸餾水充分溶解,再加磷酸 1.25mL,混勻后蓋緊(防止水分散失)沸水浴 2h;冷卻后加 20 mL 蒸餾水,4℃可保存 2 周。標準品:液體×1 瓶,1μmol/mL 標準液,4℃保存。

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