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搖瓶機在菌種培養中的使用方法及注意事項

閱讀:690        發布時間:2016-10-9

  *步:搖瓶機復蘇:根據所培養的細菌選擇適宜的培養基,大部分細菌在LB培養基中在超凈工作臺先用1毫升左右的適宜的培養基溶解冷凍菌,然后轉移到10毫升中試管(放入4毫升液體培養基)中,一般在37攝氏度搖床靜止或低轉速培養12小時或者過葉(溫度取決于所培養的細菌適宜生長的溫度)。 

在進行搖瓶機試驗前,首先檢查搖瓶機各部件,檢查氣源、電源、管路、壓力表、密封等是否正常,特別強調的是搖瓶機做為精度,高科技的儀器,搖瓶機每個過程都由的程序控制,所以要求實驗人員在操作前必須對搖瓶機的各個按鈕,流程熟練掌握,詳細閱讀搖瓶機說明書,及實驗室儀器安全操作規程。掌握了搖瓶機的基本操作要領后,逐步按以下步驟進行搖瓶機細菌培養試驗:

  第二步:搖瓶機平板劃線培養:在平板(瓊脂+液體培養基)劃線,放37攝氏度培養箱培養箱中倒置培養6小時~12小時,在平板上觀察是否形成了單菌落.

  第三步:搖瓶機挑單菌落:在超凈臺中挑選典型單菌落,置入10毫升中試管(內有5毫升液體培養基)中,在37攝氏度搖床,轉速200轉培養12小時或者過葉,肉眼能看到試管渾濁。

  第四步:搖瓶機按照1:20的比例將中試管中的菌液移到250毫升三角瓶(放入100毫升液體培養基),,培養條件同前。注意:所有的接種操作均需要在層流罩中,培養基應無菌。

以上四步,搖瓶機是一般細菌培養都會涉及到的步驟,有些操作人員在實際搖瓶機試驗過程中有時會省略復蘇這一環節,直接拿燒熱的接種環挑些菌液冰水,在平板上劃線培養,等長出菌落后,選取合適的菌落搖瓶機培養。另外,要提醒大家的是:(1)搖瓶機是搖轉方式進行混合攪拌,而發酵罐是直接機械攪拌;(2)搖瓶機發酵罐可以取樣或者儀表時時檢測,但是搖瓶機因為量小不能方便的進行控制和檢測。

 

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