三级片视频播放,精品三级片在线观看,A级性爱视频,欧美+日韩+国产+无码+小说,亲子伦XX XX熟女,秋霞最新午夜伦伦A片黑狐,韩国理伦片漂亮的保拇,一边吃奶一边做边爱完整版,欧美放荡性护士videos

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

13224517959

technology

首頁   >>   技術文章   >>   甲基化特異性PCR

上海希言科學儀器有限公司

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

甲基化特異性PCR

閱讀:2713      發布時間:2018-7-19
分享:

甲基化特異性PCR

標簽: 甲基化 特異性 PCR

DNA甲基化是一種表觀遺傳修飾,它是由DNA甲基轉移酶(DNA methyl-transferase, Dnmt)催化S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體,將胞嘧啶轉變為5-甲基胞嘧啶(mC)的一種反應,在真核生物DNA中,5-甲基胞嘧啶是唯yi存在的化學性修飾堿基。

  • 亞硫酸氫鈉法
實驗方法原理MSP是一種簡便、特異的、敏感的檢測單基因甲基化的方式。其基本原理是用亞硫酸氫鈉處理基因 組DNA,未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變,然后用3對特異性的引物對所測基因的同一核苷酸序列進行擴增。擴增產物用DNA瓊脂糖凝膠電泳,凝膠掃描觀察分析結果。
實驗材料

DNA

試劑、試劑盒

亞硫酸氫鈉、氫醌、石蠟油、乙醇

儀器、耗材

水浴鍋、PCR儀

實驗步驟

1.  在50 μl 體系中,DNA(2~5 μg)經NaOH(終濃度值0.2 mol/L)在37℃變性10 Min。

2.  對于ng級別的人基因組DNA,在進行修飾前加入2μg蛙魚精DNA為載體。


3.  加入30 μl 剛配制好的10 mmo/L 氫醌與520/1的40.5%亞硫酸氫鈉混勻。

4.  然后用石蠟油隔絕空氣的條件下,避光在50%溫育16 h。


5.  修飾后的DNA過WizerdDNA純化柱,用50/1 L 水洗脫。

6.  室溫下用NaOH(終濃度為0.3 mol/L)修飾5 min,之后用乙醇沉淀。


7.  DNA溶于20 μl 水中,立即使用或在-20℃保存。

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 普兰县| 定州市| 太白县| 呼伦贝尔市| 花垣县| 维西| 斗六市| 新竹县| 长治县| 瑞安市| 老河口市| 兴义市| 南木林县| 博兴县| 嘉定区| 广宗县| 柘城县| 高州市| 金华市| 柘城县| 东港市| 比如县| 沧州市| 康平县| 桦甸市| 铁力市| 栾城县| 甘德县| 封丘县| 建平县| 罗山县| 拉萨市| 濮阳县| 蓬溪县| 九江县| 南漳县| 香港| 新竹市| 忻州市| 三亚市| 寿宁县|