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721分光光度計的使用方法

閱讀:2472        發布時間:2011-3-1
1.檢查721A型分光光度計的旋鈕和開關,使其回復零點。2.按要求接通電源,按下“T鍵”,打開暗盒蓋和電源開關,指示燈亮。預熱20分鐘。3.調節波長旋鈕至所需波長。4.取比色皿分別盛裝B、S、U液,置入檢測室(比色皿先用蒸餾水洗后,再用比色液潤洗才能裝比色液)。B液對準光路。5.調節面板“零位細調”,使指示為00.0,即透射比“T”的零點,同時“一”號閃躍。6.合下檢測室蓋.調節“光量粗、細調”電位器,使指示為100.0,須反復5、6兩點操作達到穩定。7.按下“A”鍵,指示為“.000”同時“一”閃躍,如果指示讀數不是比值時,應調節“消光調零“電位器,使其達到要求。8.拉出或推入拉桿,使U、S液分別置于光路讀取A值,然后移動拉桿,讀B管A值,如為0,則前述A值有效。9.在穩定時,重復讀數一次,并按下“T”鍵。10.打開檢測室蓋,取出比色皿,傾去比色液于水槽中,用自來水沖洗干凈,倒置于表面皿(鋪有濾紙)中。11.關上電源開關,拔出電源插頭,取出比色皿架,檢查檢測室內是否有液體濺出,并擦凈。檢測室內放入硅膠袋,合上蓋,套上儀器罩。【計算】1.利用標準管計算測定物含量 實際測定過程中,用一已知濃度的測定物按測定管同樣處理顯色,讀取吸光度,再根據(6)式計算,即A1= K1C1l1              A2= K2C2l2式中A1、A2分別為已知濃度標準和未知濃度測定吸光度。c1、c2分別為已知濃度標準管和未知濃度測定管中測定物濃度。因盛標準液和測定液的比色杯徑長相同(l1=l2),故上二式可寫成:A1/K1C1= A2/K2C2……………………………………………(7)因標準液和測定液中溶質為同一物,K值相同,即:(7)式可換算成下式:C2=(A2/A1)× C1   …………………………………………(8)因測定液和標準液在處理過程中體積相同,故(8)式可寫成:m2 =(A2/A­1)×m1…………………………………………(9)式中m1、m2分別表示標準液和測定液中待測物的含量。(9)式為實驗操作中常用計算式。【注意事項】1.儀器須安放在穩固的工作臺上,不能隨意搬動。嚴防震動,潮濕和強光直射。2.盛裝比色液時,約達比色皿2/3體積,不宜過多或過少。若不慎使溶液流至比色皿外面須用棉花或拭鏡紙擦干,才能放入比色架。拉比色桿時要輕,以防溶液濺出,腐蝕機械。3.千萬不可用手或濾紙等物摩擦比色皿的透光面。4.比色皿用后應立即用自來水沖洗干凈,若不能洗凈,用5%中性皂溶液或洗衣粉溶液浸泡,也可用新鮮配制的重鉻酸鉀洗液短時間浸泡,然后用水沖洗干凈,倒置晾干。5.每套分光光度計上的比色皿和比色皿架不得隨意更換。6.試管或試劑不得放置于儀器上,以防試劑濺出腐蝕機殼。7.如果試劑濺在儀器上,應立即用棉花或紗布擦干。8.測定溶液濃度的光密度值宜在0.1—0.7之間zui符合光吸收定律,線性好,讀數誤差較小。如光密度超過0.1—1.0范圍,可調節比色液濃度,適當稀釋或加濃,再進行比色。9.合上檢測室蓋連續工作的時間不宜過長,以防光電管疲乏。每次讀完比色架內的一組讀數后,立即打開檢測室蓋。10.儀器連續使用不應超過2小時,必要時間歇半小時再用。11.測定未知液時,先作該溶液的吸收光譜曲線,再選擇zui大吸收峰的波長作為測定波長。12.721分光光度計的放大器暗盒及單色器箱處放有兩個硅膠筒,檢測室內放硅膠袋,應經常檢查,發現硅膠變色,應更換新硅膠或烘干再用。13.儀器較長時間不使用,應定期通電、預熱。14.儀器用完之后,須拔去電源,套上儀器罩。

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