指環蟲屬通用PCR試劑盒

Dactylogyrus spp.

產品及特點

指環蟲屬指環蟲屬(Dactylogyrus)是扁形動物門、吸蟲綱、單殖亞綱、指 環蟲科的一屬。本屬種類眾多，我國在黑龍江流域、山東、湖南、湖北、四 川、云南、貴州、福建、海南島、兩廣等地均記錄和發現大量蟲種，目前已有 近 400 種。其種類之鑒別主要依據中央大鉤的形態結構及其量度、聯結片與 輔助片的大小形狀、交接器的形態及其量度、陰道的結構等等。此屬在我國 淡水魚類的單殖吸蟲區系組成中占據重要的地位。本產品是根據 PCR 原理開 發的指環蟲屬的通用檢測試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經過精心優化，專一性強，只擴增指環蟲屬。

3. 提供陽性對照，便于區分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

指環蟲屬通用PCR試劑盒規格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。 

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。