腸球菌通用PCR試劑盒

Enterococcus spp.

產品及特點

腸球菌為革蘭陽性（G+）球菌，廣泛分布于自然環境及人和動物消化道內。 20 世紀 80 年代以來，腸球菌嚴重感染的發生率和病死率明顯升高，并且由于 腸球菌的固有耐藥和獲得性耐藥使許多常用抗菌藥物在治療腸球菌感染時失 敗。因此快速靈敏檢測腸球菌具有重要意義。本產品就是為此目的根據 PCR 原 理開發的試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經過精心優化，專一性強，只擴增腸球菌，與其他微生物沒有交叉 反應。

3. 提供陽性對照，便于區分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

腸球菌通用PCR試劑盒規格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。