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北京創新通恒科技有限公司

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DNA合成儀的在生物學中的應用

閱讀:1690      發布時間:2016-7-25
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  DNA合成儀 -在生物學中的應用
  
  DNA合成儀在分子生物學領域中的應用非常廣泛,大體可以概括為以下幾個方面。
  
  1.合成PCR引物,DNA測序引物和雜交探針
  
  2.合成生物素標記的DNA包括生物素標記的引物
  
  用于DNA固相測序法(solid-phasesequencing),采用生物素標記的引物進行PCR擴增,再用抗生物素蛋白釣出擴增產物,由于抗生物素蛋白與磁珠共價結合,所以用磁鐵吸附即可釣出擴增產物,大大簡化了DNA測序模板的純化步驟。此外,生物素標記的探針用于非放射性雜交檢測。DNA合成儀可用于合成生物素標記的探針和引物。
  
  3.合成熒光素標記的DNA包括熒光素標記的引物
  
  可在合成的DNA片段5’端標記幾種不同顏色熒光素(6-FAM、TET、HEX),用于全自動DNA測序儀,還可用于PCR片段大小分析及定量分析,即基因組型分析和基因表達水平的研究。此外熒光素標記的探針用于原位PCR雜交檢測,進行基因在染色體上的定位。而熒光素標記的DNA包括熒光素標記的引物皆可采用DNA合成儀進行合成。
  
  4.合成反義核酸
  
  反義核酸可用于反義調控和基因治療。反義調控指在體外合成與靶序列互補的DNA片段,轉化細胞后與靶序列結合,即在轉錄水平上抑制基因表達,但由于細胞內存在限制酶系統會把外源核酸降解,所以反義核酸要經硫化修飾后再轉化細胞。另外癌癥、艾滋病等也可采用反義核酸進行基因水平的治療。DNA合成儀是合成反義核酸的儀器。
  
  5.合成磷酸標記的DNA
  
  用DNA連接酶把合成的磷酸標記的DNA片段連接起來,在體外進行基因構建。磷酸標記的DNA常用DNA合成儀來合成。
  
  6.合成RNA
  
  用DNA合成儀合成的RNA主要用于核酶研究,核酶可作為生物導彈轉化到細胞中,定點切割有病基因,如癌基因等。

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