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一站式全血mRNAOUT

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所  在  地上海市

更新時間:2017-10-24 11:25:45瀏覽次數:1460次

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一站式全血mRNAOUT構建cDNA文庫、蛋白質的體外翻譯和RT-PCR方法檢測稀有的mRNA等研究常常需要從總RNA中分離mRNA,mRNA只占總RNA的1%左右,但由于帶poly(A)尾巴,所以可以通過與Oligo(dT) 纖維素的親和結合而與其他RNA(如rRNA、tRNA等)分離開。本產品專門用于從全血中一站式提取mRNA。
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一站式全血mRNAOUT One-Stop Blood mRNA Isolation Kit 25次 常溫運輸,4℃保存,有效期一年

一站式全血mRNAOUT產品及特點
構建cDNA文庫、蛋白質的體外翻譯和RT-PCR方法檢測稀有的mRNA等研究常常需要從總RNA中分離mRNA,mRNA只占總RNA的1%左右,但由于帶poly(A)尾巴,所以可以通過與Oligo(dT) 纖維素的親和結合而與其他RNA(如rRNA、tRNA等)分離開。本產品專門用于從全血中一站式提取mRNA,其操作流程如下:
具有下列特點:
1. 一站式,是由天恩澤的高效、血液RNA提取試劑和mRNA提取試劑兩個產品整合而成,即開即用,非常方便。
2. 一次可以處理0.5-1.5 mL的全血,能得到約2-3 μg總RNA,其中1-5%為mRNA。
3. 提供的Oligo(dT)纖維素吸附能力強,每克可以吸附50-80 OD的mRNA,相當于2000-3000 μ g mRNA。
4. mRNA提取過程操作簡單,只需要離心就可以完成,免去了常規(guī)的灌柱、洗柱等繁瑣操作,樣品也不會被稀釋。
5. 得到的mRNA可以直接用于構建cDNA文庫、蛋白質的體外翻譯和RT-PCR。
使用及效果
*步,用血液RNAOUT的方法提取全血總RNA,zui后用50μL洗脫,將兩管收集在一起,共得到100μL總RNA(詳見柱式血液RNAOUT的使用手冊)。
第二步,從總RNA中純化mRNA:將0.5 mL 溶液A(結合液)加入到一管裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中,放置5分鐘后離心吸棄上清后待用。將制備的總RNA100μL加熱到65℃ 5分鐘后加入等體積的溶液A,轉移到裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中,顛倒混勻數次,離心后將上清轉移到一個離心管中。用0.5 mL溶液A,混勻后4℃ 200g 離心5分鐘,小心棄上清。重復上步洗3-5次,用RNase-free水洗脫mRNA。
第三步,如果需要濃縮,可用微量核酸沉淀劑沉淀mRNA(詳見微量核酸沉淀劑使用手冊)。
注:所得mRNA只占總RNA的5%左右,很微量很珍貴,一般不宜電泳檢測。

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