單寧含量檢測(cè)試劑盒操作原理是什么！

簡(jiǎn)介：

單寧是葡萄酒中所含有的兩種酚類(lèi)化合物其中的一種物質(zhì)，尤其在紅葡萄酒中含量較多，有益于心臟血管疾病的預(yù)防。葡萄酒中的單寧一般是由葡萄籽、皮及梗浸泡發(fā)酵而來(lái)，或者是因?yàn)榇嬗谙鹉就皟?nèi)而萃取橡木內(nèi)的單寧而來(lái)。單寧的多少可以決定酒的風(fēng)味、結(jié)構(gòu)與質(zhì)地。缺乏單寧的紅酒質(zhì)地輕薄，沒(méi)有厚實(shí)的感覺(jué)，薄若萊紅酒就是典型代表。單寧豐富的紅酒可以存放經(jīng)年，并且逐漸醞釀出香醇細(xì)致的陳年風(fēng)味。當(dāng)葡萄酒入口后口腔感覺(jué)干澀，口腔黏膜會(huì)有褶皺感，那便是單寧在起作用。

產(chǎn)品說(shuō)明：
單寧是一類(lèi)廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚化合物，又稱(chēng)植物多酚。具有*的化學(xué)性質(zhì)和多種生理活性，如能與蛋白質(zhì)、生物堿、多糖結(jié)合；能與多種金屬離子發(fā)生絡(luò)合或靜電作用；具有止血、抑制微生物、抗過(guò)敏、抗突變、抗腫瘤、抗衰老等生理活性。單寧在堿性環(huán)境下與磷鉬酸反應(yīng)，生成藍(lán)色化合物，在760nm 處有大吸收峰。

檢測(cè)原理：

測(cè)定原理：?jiǎn)螌幵趬A性環(huán)境下與磷鉬酸反應(yīng)，生成藍(lán)色化合物，在760nm 處有大吸收峰。

需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。

操作步驟：
一、 單寧的提取：
按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約0.1g 組織，加入1mL蒸
餾水），充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP 管中，80℃水浴提取30min，8000 g，25℃離心10 min，取上清液待
測(cè)。

二、 測(cè)定步驟：
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至760nm，蒸餾水調(diào)零；試劑一和試劑二37℃預(yù)熱10min
以上。

混勻，室溫靜置30min，760nm 處讀取吸光值A(chǔ)，ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照，對(duì)照管只要做一管。

三、 單寧含量計(jì)算：

1、 標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.008x - 0.0021；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/mL），y 為吸光值。

2、 按樣本鮮重計(jì)算：
單寧含量（μg /g 鮮重）= [(ΔA＋0.0021) ÷0.008×V1]÷（W×V1÷V2）=125×(ΔA＋0.0021) ÷W。

3、 按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單寧含量(μg /mg prot)= [(ΔA＋0.0021) ÷0.008×V1]÷(V1×Cpr)=125×(ΔA＋0.0021) ÷Cpr。
V1：加入樣本體積，0.015mL；V2：加入提取液體積，1mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；
W：樣本鮮重，g。

單寧含量檢測(cè)試劑盒操作原理是什么！