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在對各類食品、農產品、水產品和中藥材中的農殘、半揮發性有機物分析時，樣品中一般會含有大分子物質（如色素、油脂等），如果不去除這些物質，會影響最終的分析結果及色譜柱的使用壽命。

針對此問題，在農殘、半揮發性有機物的樣品分析前，必須進行有效的凈化前處理。如果實驗室中有GPC那就事半功倍了。接下來我們不妨了解一下GPC在液相中的應用。

一種含有不同分子的樣品溶液緩慢地流經凝膠色譜柱時，各分子在柱內同時進行著兩種不同的運動：垂直向下運動和無定向的擴散運動。

大分子物質由于直徑較大，不易進入凝膠顆粒的微孔，而只能分布顆粒之間，所以在洗脫時向下移動的速度較快。

小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外，還可以進入凝膠顆粒的微孔中，即進入凝膠相內，在向下移動的過程中，從一個凝膠內擴散到顆粒間隙后再進入另一凝膠顆粒，如此不斷地進入和擴散，小分子物質的下移速度落后于大分子物質，從而使樣品中分子大的先流出色譜柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出。

樣品洗脫圖

● 凈化樣品，去除樣品中的大分子基質或者小分子干擾物質，凈化后適合采用GC，HPLC，GCMS等儀器的分析，例如食用油中抗氧化劑、多環芳烴等的測試，須通過凝膠凈化前處理方式去除油脂等干擾物，將待分析物和干擾物分離開。

● 保護分析儀器及色譜柱，防止大分子物質堵塞后續分析用色譜柱及儀器。

植物油中9種抗氧化劑的測定（凝膠滲透色譜法）。

食品中PG、THBP、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、DG和BHT等九種抗氧化劑的測定。

參考標準：《GB 5009.32-2016 食品安全國家標準 食品中9種抗氧化劑的測定》。

油脂樣品經有機溶劑溶解后，使用凝膠滲透色譜（GPC）凈化。

分別稱取沒食子酸丙酯（PG)，叔丁基對苯二酚（TBHQ)，去甲二氫愈木創酸（NDGA)，叔丁基對羧基茴香醚（BHA），2, 6-二叔丁基－4-羧甲ji苯酚（lonox-100)，沒食子酸辛酯（OG)，2, 6-二叔丁基對甲ji苯酚（BHT)，沒食子酸十二酯（DG)10mg，用乙腈溶解并定容到10mL，得1000μg/mL的單標。

稱取2, 4, 5-三羧基苯丁酮（THBP)1mg，用乙腈溶解并定容到10mL,得單標100μg/mL。

流動相配制：1L環己烷和1L乙酸乙酯等比例混勻。

精確稱取取1g油樣于10mL容量瓶中，以流動相定容至刻度，待凈化。

加標過程：精確稱取取1g油樣于10mL容量瓶中，精確加入0.2mL100μg/mL9種抗氧化劑混標，以流動相定容至刻度，得加標量為20mg/kg，上機濃度為5μg/mL。

儀器型號：月旭科技GPC1600凝膠色譜儀。

色譜柱型號：月旭Bio-Beads S-X3凝膠色譜柱，400mm×25mm；

流動相：乙酸乙酯-環己烷（1:1）；

流速：5.0mL/min；

進樣量：5.0mL；

收集時間：14-25min；

波長：254nm。

色譜柱：月旭Ultimate^® XB-C18，5μm，4.6×250mm。

流動相：A：0.5%甲酸水溶液；B：甲醇；

流速：1mL/min；

進樣量：5μL；

柱溫：35℃；

檢測波長：280nm；

梯度洗脫表：見表1。

我們可以看到使用月旭凝膠柱對植物油中9種抗氧化劑凈化提取，回收率80-101%，結果滿足要求。