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西安齊岳生物科技有限公司

抗體偶聯藥Methyl-PEG4-(CH2)3-acid的SEC譜圖

時間:2020-5-11閱讀:364
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抗體偶聯藥Methyl-PEG4-(CH2)3-acidSEC譜圖

抗體偶聯科研(ADC)作為一種生物候選科研是近年來的研究熱點。ADC科研是將單克隆抗體的性和靶向性與的小分子科研的細胞性結合成一個新的科研分子,從而形成的抗劑。這些分子由三部分組成:單克隆抗體、穩定的連接物以及細胞性小分子科研。

我們通過SEC-MSHIC-UV法來對一個半偶聯的ADC科研模擬物進行分析。該模擬物是由LC-SMCC交聯劑將丹磺酰基螢光團共價鍵合到IgG1-mAb上,形成一個載藥量不同(0-8)的抗體混合物。

SEC-MS方法中,我們選用了TSKgel SuperSW3000尺寸排阻色譜柱。將ADC注入該色譜柱中,HPLC系統與質譜相連,用于檢測DAR譜圖。

從譜圖中觀察到,每個主峰之間的分子量差異為1336 Da,對應兩個丹磺酰基熒光團分子的分子量。SEC/MS分析表明,平均DAR3.9 。

抗體偶聯藥Methyl-PEG4-(CH2)3-acid的SEC譜圖

然后,使用TSKgel Butyl-NPR疏水色譜柱和UV檢測,來確認DAR分布情況。mAb抗體結合的科研分子數越多,ADC的疏水性越大,在HIC固定相上的保留時間更長,載藥量不同的組分便可得到分離。從DAR譜圖中可以看到,DAR=0-8的各峰之間分離情況很好。

抗體偶聯藥Methyl-PEG4-(CH2)3-acid的SEC譜圖

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