如何選擇合適的蛋白交聯劑Protein crosslinker

交聯劑是一類小分子化合物，具有2個或者更多的針對基團（氨基、羧基、巰基等）的反應性末端，可以和2個或者更多的分子分別偶聯，從而使這些分子結合在一起。在生命科學研究中，巧妙地運用交聯劑可以使很多工作取得突破。

間相互作用研究 ：大多數-結合相互作用是瞬時的，通過交聯方法可以穩定或連接相互作用復合物中的成分，從而有助于鑒別這些瞬時接觸。一旦相互作用的成分被共價偶聯，可以使用其他步驟（例如細胞裂解，親和純化和電泳）來制備分析樣品，同時可維持的相互作用復合物。  生物研究（靶向科研）：將能識別表面抗原的抗體與科研共價連接，實現靶向，減少傳統化療方法對健康細胞的殺傷。  載體蛋白與半抗原的連接：半抗原只有反應原性而沒有原性。而將包被蛋白的一段序列可以和載體蛋白連接后制成疫苗，激發反應。 另外也可以通過這種方法制備單克隆抗體，并利用此單抗返回找到大分子蛋白上的抗原結合位點。在連接二者的操作中，較低的半抗原-載體蛋白摩爾比會帶來更高的抗體親和力。此外將半抗原連接在載體蛋白中間的氨基酸上比連接在其末端時產生的的抗體效價更高。  或其他分子的固相化：將通過共價鍵結合在磁珠，96孔板，玻璃等等基質上  抗體的標記、標記轉移：將抗體與酶，熒光基團或者連接用于定量測量或者定位觀察。抗體標記與修飾之前，需要用固定化的抗原純化。為了避免抗體結合抗原的位點被封閉，選擇抗體重鏈上合適位置的的氨基酸比較重要。

此外，還可以將抗體酶切，獲得抗原結合片段，然后將標記基團與抗原結合片段連接。這種方法的特點是在ELISA反應中減少了Fc片段的干擾，并且也增加了這一復合物的膜通透性，使之更適合標記活體細胞。圖3是將標記基團結合在鉸鏈區二硫鍵打開生成的巰基上。圖4是將標記基團直接結合在抗體結合片段上。

目前已經研究使用的蛋白交聯劑有100多種，在選擇合適的蛋白交聯劑時需要考慮反應的性與指向性，間臂長度性，水溶性，透膜性，選擇何種反應基團，熱反應還是光電反應，可否切斷（用于抗體標記轉移）等等因素。

西安齊岳生物供應的蛋白交聯劑產品列表：

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（2020.06.01）