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西安齊岳生物科技有限公司

熒光標記生物酶與輔酶(溶菌酶、過氧化物酶、脂肪酶)

時間:2020-9-10閱讀:509
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熒光標記生物酶與輔酶(溶菌酶、過氧化物酶、脂肪酶)

齊岳生物提供以下酶的熒光標記物:
核酸酶、蛋白酶、血清酶、HRP;辣根過氧化物酶、α-淀粉酶、β-葡聚糖酶、菠蘿蛋白酶、輔酶A、果膠酶、麥芽糖酶(麥芽提取)、尿素酶,脲酶(巨豆)、纖維素酶、蝸牛酶、乙酰膽堿酯酶(ACE)、脂肪酶、中性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶原 A、胰蛋白酶、透明質酸酶、木聚糖酶、溶菌酶(蛋清)、消化酶、淀粉酶、α-淀粉酶、α-糜蛋白酶、α類固醇脫氫酶、β-葡聚糖酶、丁酰膽堿酯酶、乙醇脫氫酶(ADH)、凝血酶、單寧酶、尿酸酶、己糖激酶、普魯蘭酶、木瓜蛋白酶、木聚糖酶、氯化溶菌酶晶體、溶葡球菌酶、甘油激酶、磷酸肌酸激酶、纖維素酶、肌酐酶、胃蛋白酶(豬源)、氧化酶、胰酶、脂肪酶、葡聚糖酶、蛋白酶K、谷氨酸脫氫酶、透明質酸酶、鏈霉蛋白酶E、激酶、磷酸酶、肽酶

葡萄糖氧化酶的熒光標記(FITC與羅丹明)
提供異硫氫酸熒光素和異硫氫酸四甲基羅丹明分別對葡萄糖氧化酶進行標記,研究了標記蛋白的吸收光譜,熒光光譜,討論了兩種染料標記的位點的差異,同時還研究了脲對標記后染料熒光的影響。

葡萄糖氧化酶是一種取源于黑曲酶的黃案蛋白,分子量大約有158000,該蛋白是二聚體,每個單體由583個氨基酸殘基和-一個 FAD(flavin adenine dinucleotide)分子結合而成,有13個a螺.旋,與FAD直接結合的有兩個。FAD起到穩定整個蛋白分子三維結構的作用。它的主要性質是專一催化R-D-葡萄糖.我們過去的工作,發現在中性糖脂的單分子膜下,葡萄糖氧化酶具有“插膜”性質。為了進一步研究與脂類的相互作用,有利用熒光染料標記。染料對蛋白的標記是研究蛋白結構,微環境等性質的手段明。利用兩種不同結構的染料對葡萄糖氧化酶進行標記,以期研究它們和的不同作用。

 

圖1是異硫氫酸四甲基羅丹明,葡萄糖氧化酶,標記后葡萄糖氧化酶的吸收光譜,從圖1中可以看出標記后蛋白的吸收光譜并沒有發生變化(氨基酸殘基的280nm,黃素390nm,450nm吸收峰),在原來的光譜上加了染料的吸收峰,554nm的吸收峰,比較單純的染料峰值發生了5nm的紅移。

 

圖2是異硫氫酸熒光素,葡茍糖氧化酶,標記后葡葛糖氧化酶的吸收光譜,同樣染料的吸收峰發生了5nm 藍移。不同染料吸收峰的紅移和藍移說明了染料結合蛋白的位點不- -樣. 這一點和 P. Saudan5的工作相似。


 

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