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人結直腸腺癌細胞說明書

閱讀:1306      發(fā)布時間:2019-07-05
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細胞名稱: Caco-2 人結直腸腺癌細胞


貼壁,上皮樣細胞


編號: 350769


產(chǎn)品形式: 2mL 凍存管× 2 支、或T25 × 1 瓶;


安全等級: 一級,安全柜或超凈臺操作


收貨須知:收貨當天發(fā)現(xiàn)異常,請在24 小時內(nèi)及時聯(lián)系客服,逾期視為收貨良好;凍存管形式,收貨后及時置于-80℃冰箱保存,若長時間不使用,應過夜轉移至液氮保藏;T25 形式,收貨后先培養(yǎng)瓶原裝置于培養(yǎng)箱靜養(yǎng)4h,然后再對細胞進行常規(guī)操作。復蘇時每管一次用完不得留存,復蘇后傳一代,即可正常使用。請嚴格按照本說明操作,否則造成細胞失活等情形,不予提供補發(fā)服務。


培養(yǎng)條件:37℃,5%CO2,CM1-1 培養(yǎng)液。CM1-1 培養(yǎng)液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM 高糖培養(yǎng)液,含谷氨酰胺,含丙酮酸鈉。


復蘇步驟:①新制100mm 平皿1 個,含12mL 上述培養(yǎng)液;②凍存管從液氮或-80℃中取出,37℃水浴1~2min,待*溶解后盡快移入安全柜復蘇;③用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,順時針搖勻;④放入(37℃,5%CO2)培養(yǎng)箱中,過夜換液,2-4 天長滿。


傳代/凍存:將舊培養(yǎng)液吸除,PBS 清洗兩遍后,加入6mL(/100mm 皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約5min 取出。傳代用12mL CM1-1 培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分3~6 皿培養(yǎng);凍存則用6mL 凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6 支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存。

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北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術研究院

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