多功能酶標儀支持光吸收、熒光、化學發光、時間分辨熒光（TRF）、熒光偏振（FP）等多模式檢測，程序編寫需結合實驗需求與儀器特性，以實現高效數據采集。以下為關鍵步驟與注意事項：

　　一、程序框架搭建

　　基礎參數設置

　　檢測模式選擇：根據實驗類型（如ELISA、細胞增殖、熒光標記蛋白檢測）選擇對應模式。例如，ELISA通常采用光吸收模式（波長450nm），熒光標記蛋白檢測需切換至熒光強度模式（如激發485nm/發射520nm）。

　　板類型定義：明確96孔板、384孔板或透明/黑白酶標板類型，避免因光路不匹配導致數據偏差。例如，熒光檢測需使用黑色酶標板以減少背景干擾。

　　多模式組合邏輯

　　順序檢測：對同一孔板依次執行光吸收和熒光檢測，需在程序中設置“板出/板入”動作（RunPlateOut/In），避免交叉污染。例如，先完成光吸收法測定細胞密度，再切換至熒光模式檢測細胞內鈣離子濃度。

　　并行檢測：部分機型支持多通道同步檢測，如同時采集光吸收和化學發光信號，需在參數中勾選“Multi-ModeParallel”選項，并設置各通道獨立波長。

　　二、關鍵參數優化

　　動力學檢測設置

　　時間間隔與循環次數：對于細胞增殖實驗，設置每15分鐘檢測一次吸光度，總循環次數24次（覆蓋24小時）。程序需包含“PlateKinetics”或“WellKinetics”選項，并定義循環時間（CycleTime）和總時長（TotalDuration）。

　　溫度與振蕩控制：在程序參數中啟用恒溫孵育（如37℃）和線性振蕩（如300rpm），確保細胞處于最佳生長狀態。

　　波長與增益調整

　　自動優化功能：利用儀器自帶的“WavelengthScan”功能掃描樣品光譜，確定最佳激發/發射波長。例如，GFP標記蛋白檢測時，掃描范圍450-550nm，步長2nm，選擇峰值波長作為檢測參數。

　　增益（Gain）設置：根據樣品信號強度調整增益值，避免信號飽和或過低。例如，低濃度樣品可將增益設為“High”，高濃度樣品設為“Low”。

　　三、自動化與數據管理

　　腳本編寫與宏錄制

　　高通量篩選：針對藥物篩選實驗，編寫腳本實現自動加樣、檢測和數據分析。例如，使用Gen5軟件的“MacroRecording”功能記錄移液器加樣步驟，并設置循環條件檢測96孔板中所有樣品。

　　條件跳轉邏輯：在程序中嵌入條件判斷語句，如“若吸光度值>2.0，則跳過后續熒光檢測”，減少無效數據采集時間。

　　數據導出與整合

　　多格式輸出：支持Excel、CSV、PDF等格式導出，并可選擇“PlateView”或“ListView”顯示數據。例如，將光吸收數據導出為Excel表格，熒光數據導出為PDF報告，便于后續分析。

　　自定義公式應用：在程序中嵌入計算公式，如雙波長扣減（如OD655-OD450）或濃度換算（如標準曲線擬合），直接輸出最終結果。

　　四、驗證與調試

　　預實驗測試

　　運行程序前，使用空白孔和標準品進行預檢測，驗證波長、增益、動力學時間等參數是否合理。例如，檢測標準曲線R²值是否≥0.99，確保定量準確性。

　　錯誤處理機制

　　在程序中設置錯誤提示（如“孔板未放置”“信號超限”），并定義重試次數或跳過策略。例如，若某孔檢測失敗，程序自動重試3次后標記為“Error”并繼續后續檢測。

　　通過以上步驟，可實現多功能酶標儀的高效多模式檢測程序編寫，兼顧數據準確性與實驗效率。