您好, 歡迎來到化工儀器網
產品分類品牌分類
-
樣品瓶和蓋墊 Thermo色譜柱 螺口頂空樣品瓶 經典型HPLC分析柱 抽屜儲藏柜 氮吹組件配件 手動壓蓋器 Propac系列離子色譜柱 Thermo Scientific 壓蓋器和去蓋器 Thermo premium 樣品瓶及蓋墊 National 樣品瓶儲藏柜 National 樣品瓶架 National 20ml 鉗口頂空套裝 National 樣品瓶配套蓋墊 SureStop 便攜套件 SMART Digest 蛋白抗體消化產品 Thermo Scientific HyperSep SPE 產品 Thermo Scientific SOLA SPE 小柱和96孔板 氮吹儀 氣相檢測工具 TRACE-TR 氣相柱 Trace GOLD毛細管氣相柱 Hypersil 經典型HPLC色譜柱 Hypurity HPLC 色譜柱 Betasil HPLC 色譜柱 BioBasic HPLC 色譜柱 BioBasic SEC 色譜柱 Hypersil Green PAH HPLC色譜柱 Hypercarb HPLC Acclaim HPLC色譜柱 Syncronis HPLC 色譜柱 Hypersil GOLD HPLC 色譜柱 進樣針 用于AGilentGC:5890,6890 用于Trace Series GC 用于TRACE 1300系列GC GC超凈筒式過濾器 BetaBasic HPLC 色譜柱 National 樣品儲存非預裝便攜套件 Thermo Scientific Choice 樣品瓶 National頂空蓋墊 National 頂空樣品瓶 National 樣品瓶和內插管 AVCS便攜套件和組裝套件 樣品瓶和瓶蓋 SWAP-IT GC-MS 接口系統 HyperREZ XP HPLC 色譜柱 ProPac/MabPac蛋白/抗體分析色譜柱 Accucore HPLC 色譜柱 MS 認證樣品瓶 GC 附件
梯度方法開發攻略之梯度條件的影響因素
閱讀：3109 發布時間：2019-10-10
今天，將為您帶來梯度方法開發攻略②：梯度條件的影響因素，共同探討在梯度條件下需要注意哪些因素。
1. 不同色譜柱的分離選擇性
2. 梯度斜率
3. 初始有機相比例
4. 梯度拐點設置
5. 流動相或柱溫優化
不同色譜柱的分離選擇性
不同色譜柱的疏水性、表面極性存在差異，因此化合物的出峰時間也會受到影響，我們可以根據化合物的特性選擇合適的色譜柱。
梯度斜率
梯度斜率 N =Δ B% / tGra （% / min）
梯度斜率越大，洗脫速度越快，但分離度同時下降。
初始有機相比例
初始比例 Binitial %，通常對于早出峰的化合物保留分離影響大。
梯度拐點設置
合理設置梯度拐點，可以有效地縮短分析時間。
流動相或柱溫優化
溫度從35℃升高到45℃，增強了化合物的分離度。
調整流動相比例，可以有效縮短分離時間。
通過更換色譜柱柱長、粒徑、流速、來獲得快速分析結果。
梯度分析中需要注意的幾個問題
1）梯度條件需要進行充分洗脫；
2）梯度進行完畢需要重新平衡回初始狀態，才能進行下一個梯度序列的分析；
3）梯度條件會造成基線漂移，需要進空白樣確定梯度基線變化；
4）注意觀察壓力變化情況；
5）當流動相中含有緩沖鹽時，在梯度有機相高點不得鹽析。